24小时热门版块排行榜    

查看: 1469  |  回复: 5
【悬赏金币】回答本帖问题,作者yaqian18将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yaqian18

新虫 (小有名气)

[求助] 双酶切 已有3人参与

我的重组质粒转化大肠杆菌后提取质粒进行双酶切酶切位点为BamHI和XhoI,为什么我的单酶切和双酶切之后的电泳图一样呢?有条带的第一,第二泳道为双酶切,第三泳道是BamHI的单酶切,第四是没有酶切的质粒,第五泳道是marker

双酶切


@youlinglyw @biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaqian18

新虫 (小有名气)

双酶切表达载体就正常,所以应该不是酶失活

发自小木虫Android客户端
3楼2022-08-16 22:28:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.用xho1也单酶切下 看看是不是某个酶失效
2.看酶有没有甲基化位点
3.重新比对序列是否有xho1 bamh
4.换一株阳性转化子重新提质粒 我之前也是单酶切怎么都切不出来 直接换另一株阳性转化子

发自小木虫Android客户端
我思故我在
2楼2022-08-16 21:44:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两个酶切位点很近?所以单酶切和双酶切长度差不多
4楼2022-08-17 09:51:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最上面的条带是未酶切的载体,如果双酶切的条带只有小几百或几十bp,载体有大几千上万的话其实双酶切的条带和单酶切电泳看位置的话分不太出来
5楼2022-08-17 09:55:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-03-05 4/200 2026-03-06 00:27 by wutongshun
[考研] 不限学校专业的调剂同学看过来 +5 啊摆啊摆 2026-03-05 8/400 2026-03-05 23:22 by 努力努力再努力x
[考研] 268求调剂 +3 刘合华 2026-03-05 3/150 2026-03-05 23:17 by 热情沙漠
[考研] 一志愿211,0860总分286食品工程专业求调剂 +4 林林Winnie 2026-03-05 4/200 2026-03-05 21:32 by zzpnuli111
[考研] 274求调剂 +9 一个学习者 2026-03-04 9/450 2026-03-05 20:56 by 黑衣馒头人
[基金申请] 成果系统访问量大,请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便,敬请谅解。 +15 xhuama 2026-03-02 17/850 2026-03-05 17:14 by 超神赏金
[考研] 302材料工程求调剂 +7 Doleres 2026-03-01 8/400 2026-03-05 09:59 by oxidpl
[考研] 293求调剂 +3 是乐渝哇 2026-03-04 3/150 2026-03-04 23:12 by wutongshun
[考研] 本科太原理工采矿工程,求调剂 +3 onlx 2026-03-01 3/150 2026-03-04 15:57 by Stephen_ym
[考研] 347分电子信息专硕求调剂 +3 咕嘟咕嘟1 2026-03-03 3/150 2026-03-04 12:32 by 热情沙漠
[考研] 0703化学学硕 288分 +4 旅行中的紫葡萄 2026-03-03 4/200 2026-03-03 23:41 by ch1979
[考研] 276求调剂 +8 路lyh123 2026-02-28 10/500 2026-03-03 18:25 by xin吖
[考研] 298求调剂 +3 人间唯你是清欢 2026-03-03 4/200 2026-03-03 18:09 by ms629
[考研] 0805总分292,求调剂 +12 幻想之殇 2026-03-01 12/600 2026-03-03 15:58 by tgxtgxtgx9
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-03-02 6/300 2026-03-03 13:46 by Iveryant
[考研] 268求调剂 +6 好运连绵不绝 2026-03-02 6/300 2026-03-03 13:03 by 秋收
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +5 awaystay 2026-03-02 6/300 2026-03-03 09:03 by houyaoxu
[考研] 化工京区271求调剂 +7 11ing 2026-03-02 7/350 2026-03-03 07:30 by 利好利好.
[考研] 298求调剂 +10 人间唯你是清欢 2026-02-28 14/700 2026-03-02 22:49 by 人间唯你是清欢
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
信息提示
请填处理意见