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cn929

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于PCR,求助~

前天我作了转基因水稻的PCR~
DNA提取效果比较好,但是没有P 出来~我的是含kana抗性的,师姐做筛选低浓度都是阳性的,我的浓度比她还高,按理说应该能转进去啊~怎么会没有条带呢?但阳性质粒对照有条带,到底是什么原因呢?PCR体系没有问题啊~~希望得到您的解答,谢谢~

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-14 at 11:52 ]
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

是不是引物的问题啊
2楼2009-09-12 22:19:10
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xuezhen

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
或许可以把DNA模板稀释一下,试试看!
3楼2009-09-13 09:27:34
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Nadia_long

新虫 (初入文坛)

没有转进去吧?
4楼2009-09-14 09:26:15
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

我的也出现这问题了,阳性PCR出来效果的特别好,别的一条带都没有,按理说反应体系应该没问题吧
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼2009-09-14 09:35:46
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nick.nye-0313

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那很难说了!你最好好好的在设计一下,肯定是有问题的!
只为成功找方法
6楼2009-09-15 11:01:40
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1    引物设计  2  做个梯度pcr试试 包括 温度梯度和 镁离子梯度 dntp 梯度

3   换别人交换做。
7楼2009-09-15 12:04:23
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heismeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做DIGESTION 有时候PCR确实做不出来 我遇到过 做了个单酶切长度都对 就直接测序了
8楼2009-09-15 12:11:08
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yxhan7113

金虫 (小有名气)

会不会是没有转进去
9楼2009-09-15 13:32:59
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