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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)

[交流] 毕赤酵母好难 已有5人参与

对于会者来说不难,但是我没有成功表达过毕赤酵母可太难了。
转化后第五天才在md上出现转化子,形态特征和酵母一样。欣喜的去用遗传霉素筛选,也得到了菌落随着梯度减少的结果。PCR怎么都p不出来,没有2200这条酵母自身的带,但是有一条1900的带(算上AOX基因加上我的目的基因正好);就顺着往下一步用目的基因引物验证了,又P不出来,唉。。:-(

毕赤酵母好难


毕赤酵母好难-1


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我思故我在
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)

我用的GS115  PPIC9K载体 sal.1单酶切 前边都没问题,转化后甚至连感受态涂md板都会有菌落,不是组氨酸缺陷的么,怎么会长呢?感觉和invitrogen的手册不是一个路数,来个大佬带带弟弟吧

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我思故我在
2楼2022-08-08 22:58:26
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木杉1123

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转化成功后这个菌就可以利用组氨酸了呀…

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2022-08-09 14:31:13
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木杉1123 at 2022-08-09 14:31:13
转化成功后这个菌就可以利用组氨酸了呀…

没转化的感受态涂布也长了,MD都按着配方配的 这个解释不了,长出来的菌p后是假阳性。 能和您交流下转化流程吗,我的转化总是不成功。

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我思故我在
4楼2022-08-09 16:08:32
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匿名

本帖仅楼主可见
5楼2022-08-10 20:33:11
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yyyyyygx

新虫 (初入文坛)

6楼2023-07-23 01:38:09
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tudo()

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题解决了吗,能不能加个联系方式

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7楼2024-01-15 20:16:19
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天照小星星

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以酶切验证下 ?加我QQ2589149676 一起分析讨论

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8楼2024-01-15 22:42:10
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