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wc卫成

铁虫 (小有名气)

[交流] pMG36e质粒,提取浓度低 已有2人参与

看文献上,别人用的DH5A,但是我用50ml过夜培养的菌液,提出的质粒浓度还是很低,想把质粒浓度提高到200ng/ul,还怎么做,换宿主菌吗,有推荐的吗

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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
dh5a就是高拷贝菌株 换个试剂盒或者优化提质粒操作

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我思故我在
2楼2022-08-07 14:13:54
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wc卫成

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 乌克兰跑男 at 2022-08-07 14:13:54
dh5a就是高拷贝菌株 换个试剂盒或者优化提质粒操作

我用的是生工质粒提取试剂盒的,5ml分别裂解后。离心取上清过同一个柱子,

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3楼2022-08-07 14:47:57
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by wc卫成 at 2022-08-07 14:47:57
我用的是生工质粒提取试剂盒的,5ml分别裂解后。离心取上清过同一个柱子,
...

看你菌液浓度了,可能是裂解液少了不完全,试剂盒上有一些solution可以翻倍加,eb洗脱重复一次

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我思故我在
4楼2022-08-07 17:05:58
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wc卫成

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 乌克兰跑男 at 2022-08-07 17:05:58
看你菌液浓度了,可能是裂解液少了不完全,试剂盒上有一些solution可以翻倍加,eb洗脱重复一次
...

不知道可能是试剂盒提的浓度低

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5楼2022-08-08 12:24:04
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司静Jing.

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以试一下:质粒转感受态过夜 挑单克隆继续分区划线(划密集一点) 待菌落成片长出后接种环刮菌泥溶于1.5ep的ddH2O中 然后试剂盒提质粒 最后用一个dna吸附柱吸附 可以很好的提高浓度~
6楼2022-08-08 18:39:15
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