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毕赤酵母感受态及转化相关问题
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用的ppic9k质粒,电转涂板后用感受态做阴性对照,第五天长菌了,形态和酵母是一样的,按理来说没有整合进去应该不长菌呀。
另外我又直接拿冻存的甘油菌涂md板,也一样长了。
我现在能解释的就是
1.野生型菌株发生突变了
2.感受态涂板MD的另一种说法:确定没染杂菌
我的菌是GS115

怀着这个疑问,我把带有质粒的转化出来的菌提了菌液做PCR,引物用的AOX,整各情况也不准确,应该是在2200bp有一个(酵母宿主的AOX),1900有一个(穿梭质粒AOX+目的基因)
如果说没有转进去,怎么会在2000+左右有一个条带呢。
我看的毕赤酵母手册说经过缺陷板后长出来95%的菌都是重组菌呀。

求大家解答,实验室实在没有技术支持,也欢迎做毕赤酵母的互相交流Q595562114

毕赤酵母感受态及转化相关问题


毕赤酵母感受态及转化相关问题-1


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青椒之路

铜虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
可以尝试直接做基因编辑整合
21楼2022-08-16 20:17:47
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yongde12楼
2022-08-05 10:47   回复  
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nono200913楼
2022-08-05 10:51   回复  
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rose.no.98楼
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gordon3994楼
2022-08-05 10:04   回复  
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tzynew2楼
2022-08-05 09:59   回复  
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53472001810楼
2022-08-05 10:36   回复  
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XG-WUST7楼
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XueMF08199楼
2022-08-05 10:25   回复  
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weiylwyl14楼
2022-08-05 11:09   回复  
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