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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 毕赤酵母感受态及转化相关问题
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)
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毕赤酵母感受态及转化相关问题
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用的ppic9k质粒，电转涂板后用感受态做阴性对照，第五天长菌了，形态和酵母是一样的，按理来说没有整合进去应该不长菌呀。
另外我又直接拿冻存的甘油菌涂md板，也一样长了。
我现在能解释的就是
1.野生型菌株发生突变了
2.感受态涂板MD的另一种说法：确定没染杂菌
我的菌是GS115

怀着这个疑问，我把带有质粒的转化出来的菌提了菌液做PCR，引物用的AOX，整各情况也不准确，应该是在2200bp有一个（酵母宿主的AOX），1900有一个（穿梭质粒AOX+目的基因）
如果说没有转进去，怎么会在2000+左右有一个条带呢。
我看的毕赤酵母手册说经过缺陷板后长出来95%的菌都是重组菌呀。

求大家解答，实验室实在没有技术支持，也欢迎做毕赤酵母的互相交流Q595562114

毕赤酵母感受态及转化相关问题


毕赤酵母感受态及转化相关问题-1


毕赤酵母感受态及转化相关问题-2


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青椒之路

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1楼2022-08-05 09:58:22
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青椒之路

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
可以尝试直接做基因编辑整合
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21楼2022-08-16 20:17:47
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yongde12楼
2022-08-05 10:47   回复  
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nono200913楼
2022-08-05 10:51   回复  
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rose.no.98楼
2022-08-05 10:24   回复  
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gordon3994楼
2022-08-05 10:04   回复  
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tzynew2楼
2022-08-05 09:59   回复  
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53472001810楼
2022-08-05 10:36   回复  
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XG-WUST7楼
2022-08-05 10:12   回复  
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chenhuanlong11楼
2022-08-05 10:42   回复  
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afengbeijing6楼
2022-08-05 10:08   回复  
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花小花?5楼
2022-08-05 10:08   回复  
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27139994983楼
2022-08-05 09:59   回复  
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XueMF08199楼
2022-08-05 10:25   回复  
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weiylwyl14楼
2022-08-05 11:09   回复  
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