应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » EMSA!!!
51/1返回列表
查看: 1632  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ZMQ68

新虫 (初入文坛)

[交流] EMSA!!! 已有5人参与

最近做EMSA，EB染色后DNA片段一直看不到。想请教有经验的前辈一些问题！！！！！

启动子必须加探针标记吗？？？很无知无助无力了。。我现在只用了纯化后的启动子片段跟蛋白孵育后跑Native-PAGE，用考马斯染蛋白有正确条带，很正常。
但是用EB染色20min紫外照胶却看不到DNA条带，不知道什么原因。是不是DNA浓度低，有没有做相关的实验，能否告知一下您的实验条件参考一下，，不胜感激！！！！！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-08-04 17:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZMQ68

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by armigera at 2022-08-05 05:29:10
DNA探针浓度太低，EB不可能染出来。要标记

请问你DNA探针不标记尝试过吗？如果浓度足够高，不标记是否可行？期待回帖!

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2022-08-05 16:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
（1） 探针的浓度够吗？ （单独跑探针染色能染上吗）
（2） 探针的大小（是否太大，没有进入分离胶；是否太小，已经跑出去了？）
（3） 探针与蛋白结合的条件是否有利于结合（镁离子是否必须，盐离子浓度超过100mM了吗？ 缓冲液的pH值是多少？）
（4） 在（3）的条件下，探针是否与蛋白结合（有实验证据吗）
（5） 是否有可能存在探针被降解的可能？
（6） 电泳过程是否大量产热，是否导致蛋白变性，或者复合物解离？
（7） 一步步做对照试验吧，一个实验不成功，很难说明哪(几)个步骤有问题

good luck~
赞一下(4人) 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2022-08-04 17:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinvijie

铁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也好奇启动子不标记是否可以检测出来

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
找博导：硕士肿瘤药理学-分子生物学方向，六级已过，口语达到能表达自己，SCI二区。
3楼2022-08-05 00:24:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuxinH

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要加标记的探针吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2022-08-05 00:57:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 化学工程321分求调剂 +18 大米饭！ 2026-03-15 22/1100 2026-03-21 20:20 by HH领袖
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +6 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-21 17:21 by 学员8dgXkO
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 洼小桶 2026-03-18 3/150 2026-03-20 22:54 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:38 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭