应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » EMSA!!!
51/1返回列表
查看: 2011  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ZMQ68

新虫 (初入文坛)

[交流] EMSA!!! 已有5人参与

最近做EMSA，EB染色后DNA片段一直看不到。想请教有经验的前辈一些问题！！！！！

启动子必须加探针标记吗？？？很无知无助无力了。。我现在只用了纯化后的启动子片段跟蛋白孵育后跑Native-PAGE，用考马斯染蛋白有正确条带，很正常。
但是用EB染色20min紫外照胶却看不到DNA条带，不知道什么原因。是不是DNA浓度低，有没有做相关的实验，能否告知一下您的实验条件参考一下，，不胜感激！！！！！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-08-04 17:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

armigera

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
DNA探针浓度太低，EB不可能染出来。要标记

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2022-08-05 05:29:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
（1） 探针的浓度够吗？ （单独跑探针染色能染上吗）
（2） 探针的大小（是否太大，没有进入分离胶；是否太小，已经跑出去了？）
（3） 探针与蛋白结合的条件是否有利于结合（镁离子是否必须，盐离子浓度超过100mM了吗？ 缓冲液的pH值是多少？）
（4） 在（3）的条件下，探针是否与蛋白结合（有实验证据吗）
（5） 是否有可能存在探针被降解的可能？
（6） 电泳过程是否大量产热，是否导致蛋白变性，或者复合物解离？
（7） 一步步做对照试验吧，一个实验不成功，很难说明哪(几)个步骤有问题

good luck~
赞一下(4人) 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2022-08-04 17:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinvijie

铁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也好奇启动子不标记是否可以检测出来

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
找博导：硕士肿瘤药理学-分子生物学方向，六级已过，口语达到能表达自己，SCI二区。
3楼2022-08-05 00:24:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuxinH

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要加标记的探针吧

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2022-08-05 00:57:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+4 David1982 2026-10-13 7/350 2026-10-14 14:24 by 13108017953
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +10 Isak0320 2026-10-12 14/700 2026-10-14 11:39 by thegarfield
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭