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求助：甲状腺上皮细胞的培养方法及注意事项
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| 最近需要培养甲状腺上皮滤泡细胞，研究甲状腺功能，请各位高手教教如何培养及注意事项，谢谢！ |
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3楼2009-09-11 16:18:35
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4楼2009-09-11 16:30:40
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一般的甲状腺细胞采用原代细胞培养技术就可以，如果是甲状腺肿瘤细胞则可以参照文献中介绍的，简单给列一下： 1.甲状腺组织取自腺瘤手术中腺旁组织，去除包膜。 2.以Hanks液(无Ca。，M92+)冲洗，将组织剪成1m一的碎块，以0．2％胶原酶消化150min。 3.过筛(200目)，离心后去上清，以RPMI—160(sigma)培养液(含10％小牛山L清，lmu／ml TsH，100u／ml青霉素)于CO25%、37℃恒温培养箱中培养，注意及时换液。（目前国内对上皮细胞的研究多采用细胞株的方式,但其离体时间长,细胞易产生变异，所以上皮细胞的保存以及传代相当关键，建议不要传代太多以免影响实验结果） 4.种板（观察药物对细胞作用）：调整细胞浓度为2×105m卜分6组接种于24孔培养板上(每组复孔4个)，每孔加入细胞悬液0．5ml，置于37℃，5％CO2。 5.培养箱中培养3d，观察细胞贴壁后继续培养4d，隔日换液1次，去除未贴壁的非甲状腺细胞。 6.待细胞呈次融合状态时，再根据你的需要加药来观察对细胞的影响。 仅供参考，最好是多看看文献或向有经验的老师请教下！ |
5楼2009-09-12 10:51:17
狼狼晴空
木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
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- 在线: 62.8小时
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- 专业: 脑血管结构、功能异常及相
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http://www.cqvip.com/qk/90443X/200101/4877151.html 看看这篇文献！希望对你有帮助 |
6楼2009-09-12 11:13:58
