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SOD活性的测定采用邻苯三酚自氧化法。 （1）邻苯三酚自氧化速率的测定：在20 mL试管中加入9 mL50 mmol/L Tris-HCl缓冲液，于25℃恒温水浴中放置20 min，用微量注射器加入40 µL25℃预热的45 mmol/L邻苯三酚溶液(用10 mmol/L HCl配制，空白管加Tris-HCl缓冲液)，立即混匀，准确反应3 min后，用微量注射器迅速加入50 µL5 %Vc溶液，立即混匀，倒入3 cm光径的比色杯中，每隔30 s测定A420一次。计算线性范围内每分钟A420的增值，此即为邻苯三酚的自氧化速率。 （2）SOD活力的测定：加入邻苯三酚前，先加一定体积的溶液，蒸馏水减少相应体积，其它条件均与上述一致，计算加酶后邻苯三酚的自氧化速率。 （3）SOD活力计算方法： 式中，A0——自氧化速率； As——加入粗酶液后的氧化速率； V ——加样体积(mL)； N ——样品稀释倍数。 |
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wangwei2008
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yumis(金币+15,VIP+0):谢谢，非常感谢！ 9-11 12:56
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本人不才，帮你试着翻译一下，不当之处，还望见谅！ SOD activity was determined by pyrogallol autoxidation method. (1) Determinationof pyrogallol auto-oxidation rate : added 9 mL 50 mmol / L Tris-HCl buffer In a 20 mL test tube, at 25 ℃ water bath for 20 min, added 40 µL25℃ prewarmed 45 mmol / L pyrogallol solution (preparation by 10 mmol /L HCl , a blank tube plus Tris-HCl buffer) by micro-syringe, mixed immediately and after reacted accurately to 3 min, quickly adding 50 µL5 %Vc solution by micro-syringe, mixed immediately, poured into 3cm optical path colorimetric cup, measured at A420 once every 30s . Calculated within the linear range of value-added at A420 which is the pyrogallol self-oxidation rate per minute. (2) Determination of SOD activity : Before adding pyrogallol, added a certain volume of solution, a corresponding reduction in volume of distilled water, and other conditions are in line with the above, calculated pyrogallol self-oxidation rate after adding enzyme. (3) SOD activity calculated as follows: 式中，A0——自氧化速率； As——加入粗酶液后的氧化速率； V ——加样体积(mL)； N ——样品稀释倍数。 Where, A0 - self-oxidation rate; As - the oxidation rate after adding the crude enzyme solution; V - loading volume (mL); N - time of dilution of sample. |
2楼2009-09-10 22:28:18