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zhangn516

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[交流] 为什么要做TA克隆？

为什么不能直接连到表达载体上，然后测序，为什么一定要先连到TA克隆上然后测序在酶切连到表达载体上呢？

请教大家：TA克隆的必要性是什么呢？

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-16 at 17:08 ]

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各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧已经有5人回复

1楼 2009-09-10 13:33:14

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

BioEPI: 1
应助: 388 (硕士)
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红花: 43
帖子: 2251
在线: 712.4小时
虫号: 111074
注册: 2005-11-20
专业: 生物化学

★ ★
zhangn516(金币+2,VIP+0): 9-10 17:31

也有TA克隆到表达载体的，又方便又省事！

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5楼2009-09-10 15:43:56

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bioxixi

木虫 (著名写手)

应助: 2 (幼儿园)
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在线: 89.5小时
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注册: 2008-11-26
性别: MM
专业: 细胞生物学

★ ★ ★ ★
zhangn516(金币+2,VIP+0): 9-10 17:30
350784478(金币+2,VIP+0):感谢回答 9-16 17:08

楼主是新手？
因为TA克隆简单成功率高，大多数的Taq酶都会在PCR产物的末端加一个碱基A，而T载体的缺口有一个凸出的T，正好可以配对，省去了对克隆载体和PCR产物的酶切，而且T载体连接的效率高，操作简单，可进行测序后对正确克隆扩大培养，切下目的片段，用于后续实验，这样得到的目的片段量大而且序列单一准确。大体就这些吧。

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2楼2009-09-10 14:22:34

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