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hhxx__ttxs

新虫 (初入文坛)

[求助] 纯化后蛋白形成沉淀 已有1人参与

求助,
最近纯化一个凝集素家族的蛋白,与32a载体构建重组质粒,ni柱纯化,可溶性蛋白,纯化后负二十保存,第二天在4℃置换成pbs溶液,但蛋白在几小时内会形成沉淀,不知为何,请教各位大佬,已尝试过加入10%甘油,适量EDTA,在洗脱液中加入终浓度0.5%吐温-20,改变PH,均已失败告终,
如果蛋白不置换在pbs,直接加入10%甘油,在做抑菌实验,elisa等实验时均是阴性结果,请各位前辈给指条明路。
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hhxx__ttxs: 金币+1, 有帮助, 我们一般默认是400mM 2022-06-29 14:35:13
可以将盐浓度提升至300mM试试看。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2022-06-28 08:32:35
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