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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助
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wc卫成

铁虫 (小有名气)

[交流] 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助 已有1人参与

挑了48h的单菌落或者是冰箱保存的平板菌，95/98°-10min作为预变性，然后就是正常的pcr，每cycle延伸1min(在大肠杆菌质粒扩增可以1min扩增出2kb片段)，30cycle，用的takara的普通taq酶，现在就是没有条带且在电泳孔里有亮(或是杂蛋白)。然后现在我的问题是怎么做能p出来呀，或者换个酶？我们实验室有酶，不知道那个可以，pcrmix吗

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1楼 2022-06-25 22:59:54
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dilidilia

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by wc卫成 at 2022-06-26 20:05:05
hhh，终于搞出来了，换成50ul体系

请问50uL体系具体是什么用量呀，我也是革兰氏阳性菌用的mix效果不太好，想问问你具体是怎么做的
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3楼2022-07-04 20:34:15
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wc卫成

铁虫 (小有名气)
hhh，终于搞出来了，换成50ul体系

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2楼2022-06-26 20:05:05
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wc卫成

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dilidilia at 2022-07-04 20:34:15
请问50uL体系具体是什么用量呀，我也是革兰氏阳性菌用的mix效果不太好，想问问你具体是怎么做的...

takara的taq酶就按照50ul体系配，然后95/10min预变性扩增就行了

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4楼2022-07-05 14:11:46
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