应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助
51/1返回列表
查看: 837  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wc卫成

铁虫 (小有名气)

[交流] 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助 已有1人参与

挑了48h的单菌落或者是冰箱保存的平板菌，95/98°-10min作为预变性，然后就是正常的pcr，每cycle延伸1min(在大肠杆菌质粒扩增可以1min扩增出2kb片段)，30cycle，用的takara的普通taq酶，现在就是没有条带且在电泳孔里有亮(或是杂蛋白)。然后现在我的问题是怎么做能p出来呀，或者换个酶？我们实验室有酶，不知道那个可以，pcrmix吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-06-25 22:59:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dilidilia

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by wc卫成 at 2022-06-26 20:05:05
hhh，终于搞出来了，换成50ul体系

请问50uL体系具体是什么用量呀，我也是革兰氏阳性菌用的mix效果不太好，想问问你具体是怎么做的
赞一下 回复此楼
3楼2022-07-04 20:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

wc卫成

铁虫 (小有名气)
hhh，终于搞出来了，换成50ul体系

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2022-06-26 20:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wc卫成

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dilidilia at 2022-07-04 20:34:15
请问50uL体系具体是什么用量呀，我也是革兰氏阳性菌用的mix效果不太好，想问问你具体是怎么做的...

takara的taq酶就按照50ul体系配，然后95/10min预变性扩增就行了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2022-07-05 14:11:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 347求调剂 +5 啊欧欧欧 2026-03-03 5/250 2026-03-04 14:10 by kakakapanpan
[考研] 347分电子信息专硕求调剂 +3 咕嘟咕嘟1 2026-03-03 3/150 2026-03-04 12:32 by 热情沙漠
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +5 15779376950 2026-03-01 7/350 2026-03-04 11:03 by 一志愿京区211
[考研] 264求调剂 +3 thext 2026-03-03 3/150 2026-03-04 09:29 by 热情沙漠
[考研] 289求调剂 +8 yang婷 2026-03-02 10/500 2026-03-04 09:10 by 无际的草原
[论文投稿] EST拒稿重投 5+3 15102603076 2026-03-02 3/150 2026-03-04 00:51 by bobvan
[考研] 0703化学 学硕 理工科均可 不区分研究方向 总分279求调剂 +5 1一11 2026-03-03 5/250 2026-03-03 23:14 by zhukairuo
[考研] 0703化学306调剂 +4 26要上岸 2026-03-03 4/200 2026-03-03 20:08 by yoyohj0427
[基金申请] 请问大家，研究风险与应对措施那里， 大家都怎么写呢 ？ +3 cauasen 2026-03-02 3/150 2026-03-03 19:43 by Tide man
[考研] 289求调剂 +7 BrightLL 2026-03-02 9/450 2026-03-03 16:02 by tgxtgxtgx9
[考研] 0805总分292，求调剂 +12 幻想之殇 2026-03-01 12/600 2026-03-03 15:58 by tgxtgxtgx9
[考研] 环境调剂 +5 柒槿levana 2026-03-01 5/250 2026-03-03 15:47 by stewie_jz
[考研] 材料类考研调剂 +6 gemmgemm 2026-03-01 7/350 2026-03-03 11:16 by EBSD
[考研] 化工335求调剂 +5 摸摸猫猫头 2026-03-02 5/250 2026-03-03 09:10 by houyaoxu
[考研] 306分材料调剂 +5 chuanzhu川烛 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:51 by 张晓芳0105
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:19 by 轻松不少随
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +4 hit_aiot 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:53 by 一声问好
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭