应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助
41/1返回列表
查看: 839  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wc卫成

铁虫 (小有名气)

[交流] 革兰氏阳性菌(短乳杆菌)菌落pcr无条带求助 已有1人参与

挑了48h的单菌落或者是冰箱保存的平板菌，95/98°-10min作为预变性，然后就是正常的pcr，每cycle延伸1min(在大肠杆菌质粒扩增可以1min扩增出2kb片段)，30cycle，用的takara的普通taq酶，现在就是没有条带且在电泳孔里有亮(或是杂蛋白)。然后现在我的问题是怎么做能p出来呀，或者换个酶？我们实验室有酶，不知道那个可以，pcrmix吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-06-25 22:59:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wc卫成

铁虫 (小有名气)
hhh，终于搞出来了，换成50ul体系

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2022-06-26 20:05:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dilidilia

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by wc卫成 at 2022-06-26 20:05:05
hhh，终于搞出来了，换成50ul体系

请问50uL体系具体是什么用量呀，我也是革兰氏阳性菌用的mix效果不太好，想问问你具体是怎么做的
赞一下 回复此楼
3楼2022-07-04 20:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wc卫成

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dilidilia at 2022-07-04 20:34:15
请问50uL体系具体是什么用量呀，我也是革兰氏阳性菌用的mix效果不太好，想问问你具体是怎么做的...

takara的taq酶就按照50ul体系配，然后95/10min预变性扩增就行了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2022-07-05 14:11:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wc卫成 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286 +3 ksncj 2026-03-04 3/150 2026-03-04 18:24 by houyaoxu
[考研] 085701环境工程 求调剂 +6 xiiiia 2026-03-04 6/300 2026-03-04 16:45 by yuningshan
[考研] 能动297求调剂，本科川大 +4 邵11 2026-03-04 4/200 2026-03-04 15:29 by lylylyheart
[考研] 一志愿西交大材料学硕 346 求调剂 +3 zju51 2026-03-04 3/150 2026-03-04 13:01 by zhukairuo
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +4 更多的是 2026-02-27 5/250 2026-03-03 17:44 by wenium
[基金申请] 没有青基直接申请面上，感觉自己疯了 +5 kevin63t 2026-03-02 6/300 2026-03-03 17:15 by taoyijie
[考研] 085602化学工程350，调剂，有没有211的 +5 利好利好. 2026-03-02 9/450 2026-03-03 17:06 by 利好利好.
[考研] 材料270求调剂 6+6 Eiiiio 2026-03-01 11/550 2026-03-03 15:04 by Phoebelala
[考研] 计算机学硕 分数285求调剂 +4 glwshine 2026-03-02 5/250 2026-03-03 14:27 by king呀
[考研] 268求调剂 +6 好运连绵不绝 2026-03-02 6/300 2026-03-03 13:03 by 秋收
[考研] 299求调剂 +5 kkcoco25 2026-03-02 9/450 2026-03-03 12:55 by 公瑾逍遥
[考研] 化工335求调剂 +5 摸摸猫猫头 2026-03-02 5/250 2026-03-03 09:10 by houyaoxu
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +5 awaystay 2026-03-02 6/300 2026-03-03 09:03 by houyaoxu
[考研] 考研复试调剂，过国家线的同学都可报名 +7 黑！在干嘛 2026-02-28 8/400 2026-03-03 08:39 by ww哈
[考研] 化工京区271求调剂 +7 11ing 2026-03-02 7/350 2026-03-03 07:30 by 利好利好.
[考研] 288求调剂 +3 少71.8 2026-03-02 5/250 2026-03-03 06:01 by tgxtgxtgx9
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:19 by 轻松不少随
[考研] 一志愿中石油（华东）本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:54 by caszguilin
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭