| 查看: 984 | 回复: 2 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者xiko5574将赠送您 5 个金币 | |||
[求助]
TA克隆质粒测序
|
|||
| 最近在做TA克隆，想把EGFP片段连接在克隆载体上，载体选的是takara的T-Vector pMD19 (Simple)，酶是taq酶，连接转化后挑白色阳性菌落扩增，菌液分别用m13通用引物和目的片段引物pcr都能得到目的片段，但菌液和通用引物pcr产物分别送公司测序后结果与EGFP和T载体完全比对不上。测序结果ncbi上blast后发现是其他克隆载体的新霉素抗性基因，但挑了蓝色阴性菌落提质粒送测序结果和T载体能比对上，说明载体没问题，EGFP片段连接之前测序也是没问题那是哪里出了问题呢？做了两次，测序结果都是一样的，现在怀疑是感受态细胞的问题，想问问各位虫友的意见。 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有95人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
fengxianp
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 162.3
- 帖子: 72
- 在线: 11.1小时
- 虫号: 29804258
- 注册: 2022-06-22
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2022-07-11 10:58:11
乌克兰跑男
铜虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1588
- 散金: 420
- 帖子: 663
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 29162179
- 注册: 2022-03-15
- 性别: GG
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
3楼2022-08-07 03:35:25
