| 查看: 1131 | 回复: 2 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者xiko5574将赠送您 5 个金币 | ||
[求助]
TA克隆质粒测序
|
||
| 最近在做TA克隆，想把EGFP片段连接在克隆载体上，载体选的是takara的T-Vector pMD19 (Simple)，酶是taq酶，连接转化后挑白色阳性菌落扩增，菌液分别用m13通用引物和目的片段引物pcr都能得到目的片段，但菌液和通用引物pcr产物分别送公司测序后结果与EGFP和T载体完全比对不上。测序结果ncbi上blast后发现是其他克隆载体的新霉素抗性基因，但挑了蓝色阴性菌落提质粒送测序结果和T载体能比对上，说明载体没问题，EGFP片段连接之前测序也是没问题那是哪里出了问题呢？做了两次，测序结果都是一样的，现在怀疑是感受态细胞的问题，想问问各位虫友的意见。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有70人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
fengxianp
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 162.3
- 帖子: 72
- 在线: 11.1小时
- 虫号: 29804258
- 注册: 2022-06-22
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2022-07-11 10:58:11
乌克兰跑男
铜虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1588
- 散金: 420
- 帖子: 663
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 29162179
- 注册: 2022-03-15
- 性别: GG
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
3楼2022-08-07 03:35:25
投票:
