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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测CAT酶活时遇到的问题？
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wjnihao

金虫 (初入文坛)

[交流] 测CAT酶活时遇到的问题？

我今天在测CAT酶活时遇到的问题，我用水调零后，然后加酶液后，OD值居然一直没有变化，我是当天提的酶不会有问题的，我做了十遍还是那样，不只是咋回事，望高手指点一下。我前几次没遇到这样的情况。谢谢！

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-15 at 10:51 ]
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1楼 2009-09-09 22:53:11
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zhang6871

银虫 (正式写手)
★
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测定这东西影响因素太多，不要看文献上的那个误差棒那么小，很多都是假的（大多是中国人），你看看好的实验室很少测定这东西。像CAT这东西测定出来不一定可信，所以建议楼主不要测定这类指标，意义不大。这仅仅是个人建议！
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过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手!多记，心静，多动手，贴近大自然!
5楼2009-09-10 22:58:52
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
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CAT 是啥酶啊？是不是过氧化氢酶？
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-09-10 15:53:07
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wjnihao

金虫 (初入文坛)
是的。
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3楼2009-09-10 16:50:54
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yangxiaofei

1 检查机器是否work，比色杯是否干净
2 确定药品是没有问题的，溶液的pH值是否发生了变化
3 是否是稀释倍数过高？
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4楼2009-09-10 22:47:25
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晴空一鹤

木虫 (小有名气)
★
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问题可能在于底物过氧化氢的分解（试剂非新配）或酶活性过低，增大加样量。
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6楼2009-09-11 13:16:28
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
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我测过就是磷酸盐缓冲体系溶解过氧化氢做底物，CAT是大肠杆菌冰浴超声破碎的上清液。酶液以后就可以看到有很多气泡生成啊，过氧化氢吸光值在20sec内下降就很快的啊。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
7楼2009-09-11 21:07:48
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
要是有还有问题的话我就把详细的测定步骤和计算过程贴上来
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-09-11 21:09:17
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wjnihao

金虫 (初入文坛)
哈哈，谢谢大家的帮助谢谢！我会试试的！
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9楼2009-09-11 22:30:05
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wjnihao

金虫 (初入文坛)

郁闷啊，最近不知咋地培养基全部霉菌污染

我这两天在做组织培养，我的培养皿是在固体模式下121℃，20min.下灭菌的。灭完后在烘箱烘干的，之后倒培养皿。倒完后我就放在超净台了，一直风吹2-3小时。之后我就拿保鲜膜包起来，可是3-4天后全部霉菌污染，我都做两次了还是这样，不知啥原因，请高手赐教，谢谢！
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10楼2009-10-25 15:03:36
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