24小时热门版块排行榜    

查看: 3251  |  回复: 12
【悬赏金币】回答本帖问题,作者Prince小王子将赠送您 15 个金币

Prince小王子

新虫 (初入文坛)

[求助] 温敏质粒 已有1人参与

各位大神,本人正在使用温敏质粒(pset4s)进行基因敲除,转化过后无论在37℃还是40℃,温敏质粒都无法丢失。有没有大神遇到这种情况,该如何解决呢。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lucklizhen

新虫 (正式写手)

一直做稀释方法看看吧。
5楼2022-06-02 11:11:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yugege2009

至尊木虫 (知名作家)

2楼2022-06-01 14:43:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Prince小王子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yugege2009 at 2022-06-01 14:43:05
做分子育种?

只是单纯的敲除基因,构建缺失株
3楼2022-06-01 15:04:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

隐约

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是怎么知道没有丢失的?用的点板方法?
4楼2022-06-02 09:36:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

画画的bb

铁虫 (初入文坛)

我这边可以直接做细胞株的
15371815028
6楼2022-06-02 14:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)


pset4s是一种温敏基因敲除质粒,一般用来做链球菌的基因敲除。

发自小木虫Android客户端
7楼2022-06-04 15:29:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Prince小王子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 隐约 at 2022-06-02 09:36:32
你是怎么知道没有丢失的?用的点板方法?

因为质粒上带有抗性基因,无论在37℃还是40℃培养后,在抗性平板上都能够生长。
8楼2022-06-06 19:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Prince小王子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by forhighbio at 2022-06-04 15:29:54
pset4s是一种温敏基因敲除质粒,一般用来做链球菌的基因敲除。

对的,我就是打算敲除链球菌基因的
9楼2022-06-06 19:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Prince小王子

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lucklizhen at 2022-06-02 11:11:10
一直做稀释方法看看吧。

我尝试过一直稀释,但是需要连续稀释好多次才能够将质粒丢失,而成功丢失的菌也都变成野生型,基因无法敲除。我也试过转空载体(不加敲除基因同源臂),空载体转化后,在37℃或40℃培养一代就能丢失。
10楼2022-06-06 20:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Prince小王子 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3xN9SualEUPt 2026-10-24 6/300 2026-10-26 02:42 by cLOojpOxkX0G
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-26 02:29 by cLOojpOxkX0G
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 5/250 2026-10-26 02:18 by cLOojpOxkX0G
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-26 02:16 by cLOojpOxkX0G
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3xN9SualEUPt 2026-10-24 5/250 2026-10-26 02:05 by cLOojpOxkX0G
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-26 02:03 by cLOojpOxkX0G
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 5/250 2026-10-26 01:50 by cLOojpOxkX0G
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 10/500 2026-10-26 01:07 by cLOojpOxkX0G
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 12/600 2026-10-26 00:54 by cLOojpOxkX0G
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 9/450 2026-10-26 00:34 by cLOojpOxkX0G
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 5/250 2026-10-26 00:32 by cLOojpOxkX0G
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 9/450 2026-10-26 00:28 by cLOojpOxkX0G
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 8/400 2026-10-26 00:21 by cLOojpOxkX0G
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 GVGRDgNfv7P4 2026-10-23 10/500 2026-10-26 00:15 by cLOojpOxkX0G
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 DI1qFHFK0KbE 2026-10-24 4/200 2026-10-25 13:18 by XiYP04It3Evb
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 8/400 2026-10-25 00:15 by XcOYG53d3x4p
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 3/150 2026-10-24 18:23 by WqtG0Aem8Ufl
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 3/150 2026-10-24 15:41 by Equinoxhua
[考博] 27秋申博自荐 +4 且听风吟时 2026-10-21 4/200 2026-10-23 13:26 by 大大大肥虫
[考博] 郑州大学申博 +5 stars~ 2026-10-19 8/400 2026-10-22 15:06 by stars~
信息提示
请填处理意见