| 查看: 787 | 回复: 2 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者陈_小铜将赠送您 5 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
求助！金葡电转化一直不成功，请各位大侠指教！
|
|||
|
最近做金葡电转化一直转不进去，制备感受态是用0.5M蔗糖溶液，菌液OD值从0.6降到0.3到0.25都试过了，用的电转条件是仪器自带的金葡电转程序电压2.9kV，也试了2.5kV，都没有转成功过。请各位大侠指点，感激不尽！ @天使托 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域
已经有32人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有27人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有10人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有10人回复
-
阿姨
已经有4人回复
-
一作与独作在应聘高校教师时区别大吗
已经有4人回复
-
静等基金结果
已经有21人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有28人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有6人回复
-
filecode
已经有16人回复
|
解决了，虽然电转率不高，但是也算转进去了。 感受态制备： 1、将菌液（100mL）培养至OD600=0.25左右，冰浴30分钟 2、5000rpm离心10min，弃上清 3、用等体积0.5M蔗糖溶液重悬沉淀，冰浴5min，4℃，5000rpm离心10min，弃上清 4、用1/2体积0.5M蔗糖溶液重悬沉淀，冰浴5min，4℃，5000rpm离心10min，弃上清 5、用1/5体积0.5M蔗糖溶液重悬沉淀，冰浴5min，4℃，5000rpm离心10min，弃上清 6、用1/50体积0.5M蔗糖溶液重悬沉淀，冰浴5min，4℃，5000rpm离心10min，弃上清 7、用适量(500ul)0.5M蔗糖溶液重悬沉淀，分装为50ul一管，-80℃冰箱储存。 电转 50ul感受态金葡+3/5/7ul质粒电转化，条件用的是伯乐电转仪自带的金葡电转程序（2900V，100欧，25uF) 电转结果质粒浓度高的，长出来的单菌落会多一些。 希望对您有点帮助。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2022-06-06 22:44:51
2楼2022-06-06 20:06:15
