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songe0310

木虫 (著名写手)

傻~傻得没得说的~

[交流] 金币求助,过柱

现准备装一个内径10cm的硅胶柱,有几个问题想请教一下:
1、准备上样干膏25g,拌样后50g左右,内径10cm是否合适?
2、径高比1:8~10是什么?是装柱后柱子内径与硅胶高度的比例吗?
3、如选择内径10cm的柱子,装柱硅胶高度大概是多少?是80~100cm,这好像不太合适吧,计算一下用的硅胶量太大了
4、如果上样高度1cm,装柱硅胶高度大概多少?
5、内径10cm的柱子,湿法上样好还是干法上样好,湿法上样要加脱脂棉、玻璃球吗?
6、粗分一般设几个梯度?梯度的筛选跑板如何确定?

新手弱弱的问 感谢回帖


[ Last edited by songe0310 on 2009-9-9 at 14:13 ]
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你就傻下去吧~~
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yqx1985

木虫 (著名写手)

云中仙


songe0310(金币+1,VIP+0): 9-10 16:45
引用回帖:
Originally posted by songe0310 at 2009-9-9 14:17:



能分出来就是硬道理是吗?

呵呵,对的。过柱子基本上是经验之谈,更多的是自己摸索。你可以试试两次过柱子的结果,能重复上比较难。更多的时候你可以把它和HPLC一起想想,比如上样量,最小冲洗倍数,乙醇含量,都是有一定的相关性的。
人面不知何时去,桃花依旧笑春风
9楼2009-09-09 14:28:23
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wuka321

铁虫 (初入文坛)


songe0310(金币+1,VIP+0): 9-9 10:11
柱体积一般是浸膏量的10倍,如50克,就应用体积约500ml的柱子。
2楼2009-09-09 10:03:09
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songsong_s

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-9 13:40
songe0310(金币+1,VIP+0): 9-9 13:41
chzhbin(金币+1,VIP+0):鼓励一下! 9-9 20:36
50g的样至少应该用装柱后十倍的高度的硅胶 可以大概看下高度 克数不是严格限定的;一般大柱子用干法比较省溶剂,不过看你用的什么洗脱剂了,有的易挥发的在天热的时候很容易花柱影响效果,所以一般不是特别大的我们还是用湿法装好;是说下面的脱脂棉吗,这个和干法湿法关系不大啊,看个人习惯了,我们一般都加,然后顶上洒硅胶或海砂防止液体砸坏样品层;梯度的设置也不是限定的 看你要哪些东西了,根据你要分得的东西在薄层上的状态来选,虽说粗分但还是能得到最好啊,薄层比例不能照搬到柱子上就得到板上的效果。
3楼2009-09-09 13:23:56
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quiet510

木虫 (著名写手)

邀月独酌


songe0310(金币+1,VIP+0): 9-9 14:13
这些都是不好说的得具体分析啊,薄层跑的怎么样啊~
Twirlingintime~
4楼2009-09-09 13:56:32
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