| 查看: 594 | 回复: 2 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者1346753608将赠送您 5 个金币 | ||
[求助]
酵母 蛋白提取 三氯乙酸 丙酮 western blot
|
||
| 最近在做酿酒酵母自噬相关的课题，在酵母蛋白提取这方面有些不明白的地方，希望能够能到大神的解答。文献中描述获得2OD 酵母细胞后，离心去上清，加入500uL 10%的三氯乙酸沉淀蛋白，之后用预冷的1mL丙酮洗涤两次，离心去上清风干蛋白颗粒后加入100uL上样缓冲液重悬蛋白，再加入等体积的酸洗玻璃珠涡旋三分钟后煮样，想知道丙酮洗涤的目的是去三氯乙酸吗？加入酸洗玻璃珠的目的是什么呢？用这样处理的蛋白样品做western blot 显色条带特别浅，文献里的图条带很清晰很漂亮，但是我的每张照片的曝光时间都在1分钟左右，也不知道是什么原因导致的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工（0856）304求B区调剂
已经有11人回复
-
211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习
已经有3人回复
-
297求调剂
已经有4人回复
-
【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475
已经有5人回复
-
282 求调剂
已经有3人回复
-
材料080500调剂求收留
已经有3人回复
-
331求调剂（0703有机化学
已经有6人回复
-
308 085701 四六级已过求调剂
已经有14人回复
-
297一志愿上交085600求调剂
已经有3人回复
-
学硕285求调剂
已经有46人回复
2楼2022-06-30 12:22:47
tevejdey
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 402.3
- 散金: 283
- 帖子: 202
- 在线: 36.6小时
- 虫号: 18247656
- 注册: 2019-10-17
- 专业: 环境微生物学
3楼2022-08-12 10:40:30
