24小时热门版块排行榜    

查看: 1290  |  回复: 7
当前主题已经存档。

huij007

铜虫 (小有名气)

[交流] 如何设计3‘和5’RACE的引物?

最近老板让做race,无奈啥也不懂,也不知道末端引物应该怎么设计?是不是通用引物呀?请高手虫子指点!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jack6335

铁杆木虫 (正式写手)


huij007(金币+1):谢谢参与
我们都用试剂盒。
砖石王老三!!!
2楼2009-09-08 21:05:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader


huij007(金币+1):谢谢参与
试剂盒能够快一点,当然你也可以自己按试剂盒配比分别单买试剂。现在smart race 比较流行,你可以试一试,而且价格也不是那么贵;忘了说了,不用你设计引物,但是如果你要是有你全长序列中的一段序列已知的话就更好了,操作会容易一些。

[ Last edited by sutao1979 on 2009-9-8 at 21:11 ]
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-09-08 21:10:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)

和正常的引物设计一样,关键是Tm要高,提高扩增的特异性,如果你什么基础都没有的话,建议把invitrogen和Clontech的RACE kit说明书看一下
4楼2009-09-09 10:08:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

我也很是期待
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
5楼2009-11-11 00:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们用的是takara的试剂盒,也还可以
就是根据你的已知序列分别设计两条特异引物,3‘是设计两条上游引物,5’设计的两条下游引物,一般来说,GC的比要比较高,碱基数也有要求范围,每个试剂盒的说明书应该有会写明适合该试剂盒的引物设计,lz好好看说明吧
6楼2009-11-11 08:57:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huij007

铜虫 (小有名气)

好的 谢谢大家提供的意见和建议了
7楼2009-12-22 07:59:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)

过来学习一下!
8楼2009-12-22 08:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huij007 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +42 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 44/2200 2026-08-14 00:45 by J0NtvlhbsrfV
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
请填处理意见