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Florannn

新虫 (初入文坛)

[交流] Western blot结果分析 已有1人参与

我想问下蛋白条带是这样的结果可能是什么原因造成的呢?
我疑惑的问题主要是有两个:
1.蛋白印记太浅,我使用的设备是伯乐经典三件套,采用的是湿转,检测的是内参GAPDH,二抗选择的是荧光二抗Alexa488,扫膜的设备是GE Amersham Typhoon多光谱激光成像仪。通常情况下使用奥德赛进行荧光成像的话,选择的是Alexa680,所以我觉得可能的原因之一是二抗不行
2.条带趋势有问题。其中有两个孔的样品是对先进行IP将GAPDH拉下来的样品,还有两个样品是对拉完GAPHD的样品的上清,结果根本看不到至少两个样品出现明显的变少的情况。但是这个条带看起来也不像非特异。
求大神帮忙分析下这种结果有可能是哪里出了问题?

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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
尽量用HRP二抗,不要用荧光二抗。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2022-05-12 09:26:15
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