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MAIT

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆摇菌摇不起来 已有2人参与

我做的TA克隆,氨苄抗性板子上长满了单菌落,挑取单菌落,300微升LB摇菌6h变混浊,做菌液PCR,有目的条带。取10微升菌液转移至5mlLB中,摇16h未变混浊,提取质粒浓度为36微克/ml,跑PCR为阳性,但酶切后和未酶切跑电泳均无条带。

?目前问题:1、为什么菌摇不起来?2、为什么电泳无条带

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金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
接种量太少,多加点就行了
3楼2022-04-27 10:45:00
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soutree

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有没有试试新的Amp? Amp很容易失活

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2楼2022-04-27 08:17:58
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MAIT

新虫 (小有名气)

我还出现了一个新问题,PCR有条带,酶切跑胶啥都没,提出来的质粒也是啥都没

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4楼2022-04-28 23:21:55
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