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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » TA克隆摇菌摇不起来
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MAIT

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆摇菌摇不起来 已有2人参与

我做的TA克隆，氨苄抗性板子上长满了单菌落，挑取单菌落，300微升LB摇菌6h变混浊，做菌液PCR，有目的条带。取10微升菌液转移至5mlLB中，摇16h未变混浊，提取质粒浓度为36微克/ml，跑PCR为阳性，但酶切后和未酶切跑电泳均无条带。

?目前问题：1、为什么菌摇不起来？2、为什么电泳无条带

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1楼 2022-04-26 23:41:54
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soutree

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有没有试试新的Amp? Amp很容易失活

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2楼2022-04-27 08:17:58
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金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
接种量太少，多加点就行了
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3楼2022-04-27 10:45:00
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MAIT

新虫 (小有名气)
我还出现了一个新问题，PCR有条带，酶切跑胶啥都没，提出来的质粒也是啥都没

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4楼2022-04-28 23:21:55
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