24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 721  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

新用户名

铜虫 (小有名气)

[交流] 【交流/求助】关于全长序列引物设计

用RACE扩增出5'端片段和3'端序列,拼接后得到全长序列,怎么设计扩增全长序列的引物,是从阅读框两端设计,还是从全长序列起始端(非编码区域内)设计?请各位指点一下,谢谢
补充:用软件拼接后cDNA序列(包括5'UTR、编码框、3'UTR)如果从编码框两端 设计引物,那么缺少非编码区的序列对转基因的表达有影响没有?

[ Last edited by amisking on 2009-12-9 at 18:00 ]
回复此楼
春天 把老 婆种 下, 秋天 就能 收获 很多 老婆 (*^__^*)
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
新用户名(金币+5,VIP+0):谢谢 9-7 22:47
如果只是要做功能鉴定,设计引物时上游从ATG开始即可,下游引物从TAG或TAA开始即可,两端最好加上克隆到表达载体的酶切点,引物长度可以控制在25bp左右退火温度也稍高一些,可以提高RTPCR扩增的特异性
4楼2009-09-07 20:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

695

木虫 (职业作家)


新用户名(金币+1,VIP+0): 12-9 17:57
友情帮顶,我过段时间也要开始这项工作了
2楼2009-09-07 19:31:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flamingdog1982

木虫 (小有名气)


新用户名(金币+1,VIP+0): 12-9 17:57
如上,与楼主后续实验目的有关。
一直认为,没有最好,只有更好!
6楼2009-09-07 21:23:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
新用户名(金币+2,VIP+0): 12-9 17:58
那要看你得到序列的目的是什么,如有比较成熟的表达体系可以只要CDS区
9楼2009-09-08 17:16:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂推荐 +4 小聂爱学习 2026-04-14 4/200 2026-04-14 20:54 by fqwang
[考研] 化学070300 求调剂 +23 哈哈哈^_^ 2026-04-12 23/1150 2026-04-14 16:30 by zhouxiaoyu
[考研] 297,工科调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-14 6/300 2026-04-14 16:04 by Art1977
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 071000生物学调剂求助 +18 zzzzwww 2026-04-09 21/1050 2026-04-14 15:39 by zs92450
[考研] 271求调剂 +35 2261744733 2026-04-11 41/2050 2026-04-14 15:36 by zs92450
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +10 刘墨墨 2026-04-13 10/500 2026-04-14 15:16 by zs92450
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见