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wanghong-0714

木虫 (正式写手)

[交流] 求大家帮我分析一下RNA电泳图和PCR产物电泳图

大家好
这是我提取的水稻和飞虱的RNA电泳图谱,120V电泳20min
最左边的和最右边的为Marker。从左向右泳道1,2,4,5,6,7为水稻RNA 泳道3为飞虱(一种昆虫)的RNA,OD值测定为1.3多,这样的RNA质量可以吗?可以做RT-PCR吗

[ Last edited by amisking on 2009-9-6 at 15:29 ]
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aqi96

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+1,VIP+0):谢谢交流 9-7 07:31
从marker来看,电泳系统没有问题。
最大的问题就是:反转录出问题了。重新做一次反转录,加个阳性对照。这样可以判断是否RNA的问题。
到了PCR这一步,再加个阳性对照,判断是否cDNA的问题。

这样,基本就搞定了。
做最好的自己
5楼2009-09-07 00:00:41
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wanghong-0714

木虫 (正式写手)

纠正

上面的是RT-PCR电泳图谱,没有得到目的片段,目的片段是445bp,请大家帮忙分析是怎么回事?
2楼2009-09-06 15:12:52
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changes

木虫 (正式写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 9-6 17:28
原因比较多吧,引物是否合适、模板是否完整、体系是否合理??
建议先利用内标基因引物先扩增下cDNA模板。
3楼2009-09-06 16:50:12
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like8866


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果RNA的质量没问题,很可能是反转没成功,检查一下体系。
4楼2009-09-06 19:29:19
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