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weishushu

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱柱活化后压力过高 已有2人参与

使用新的色谱柱,按照活化要求操作,先用甲醇100%洗一个小时,然后大剃度洗100到10到100,洗一个小时。结果柱压超级高,怎么回事呢,求解答。(18柱)

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bcschina

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议先仔细看看该款色谱柱的说明书  是否允许用甲醇这样梯度洗脱   如果这样操作不会伤害柱子  大概率  是梯度洗脱过程中  有有机物被洗脱出来  但来不及经过检测器   就又被后续高比例的水相析出 (溶解度低而析出)  堵塞在某段管路中  从而导致背压高    把柱子拆下   直接前后相连   看没有柱子  系统的背压是多少  便于判断背压是出现在柱子还是柱外管路中    如果是管路  大概率是这个原因   供参考  多年没有上来小木虫应助了  :)
2楼2022-04-02 10:33:21
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先请问色谱柱什么规格,多少压力。其次冲洗方法用甲醇没问题,但一般建议低流速冲洗较长时间,平稳后逐渐过渡至大流速,为防止残留物污染堵塞液相系统,不建议冲柱时接入检测器。如果压力确实很高,请倒序拆解管路,排除确认是否真的是柱压过高。如确认,可反向冲洗色谱柱(不要接检测器)观察压力能否恢复常态。
3楼2022-04-02 11:05:12
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