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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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zsm0507

金虫 (小有名气)

[交流] 诡异PCR扩增,扩出来一次,就再也扩不出来了

诡异PCR扩增,就第一次扩出来了,以后再也扩不出来了,或者条件和扩出来那次没有任何改变,真的快郁闷死了。希望PCR高手指点下,万分感谢!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-6 at 08:34 ]
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houjinglhy

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amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 9-5 14:56
zsm0507(金币+1,VIP+0): 9-13 08:30
这个原因太多了 你一个一个排查吧
首先确定质粒和酶没问题!
模板和酶用的越少越好,退火温度能高则高!
换条件试试吧
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
6楼2009-09-05 13:38:30
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paulajjh

木虫 (著名写手)

你用的什么模板啊?
2楼2009-09-05 10:57:15
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paulajjh

木虫 (著名写手)

我之前做过细菌基因的PCR,如果用菌液,很不稳定,经常重复性很差.但后来提取基因组,再P就很稳定了
3楼2009-09-05 10:58:16
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112976553

金虫 (小有名气)

多P几次,总会成功~

我许下第一千零一个愿望
4楼2009-09-05 11:02:41
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