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[交流]
截短突变相关问题
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各位虫子们好，我现在正在做将一段基因截短的突变。用PCR技术，酶是NEB公司的primerstar，将目的基因中间的一段基因和载体一起P下来。具体过程是先进行PCR后电泳检测是否P出了目的质粒，然后切胶回收，切胶回收的产物进行DpnI消化，然后进行磷酸化，最后是连接和转化。但是做了三次最后转化大肠杆菌DH5a感受态后，都没有长出单克隆（不是转化的问题），请虫子们帮忙分析一下原因啊，谢谢了！ [ Last edited by 350784478 on 2009-9-5 at 09:24 ] |
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