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截短突变相关问题
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各位虫子们好,我现在正在做将一段基因截短的突变。用PCR技术,酶是NEB公司的primerstar,将目的基因中间的一段基因和载体一起P下来。具体过程是先进行PCR后电泳检测是否P出了目的质粒,然后切胶回收,切胶回收的产物进行DpnI消化,然后进行磷酸化,最后是连接和转化。但是做了三次最后转化大肠杆菌DH5a感受态后,都没有长出单克隆(不是转化的问题),请虫子们帮忙分析一下原因啊,谢谢了!![]() [ Last edited by 350784478 on 2009-9-5 at 09:24 ] |
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