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swjtumick

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】求一pH为7.4的醋酸盐缓冲液配方已有1人参与

100 ml of 100 mmol/l Ca(CH3COO)2 H2O solution and 100 ml of 60 mmol/l NH4H2PO4 solution were added into 200 ml of mechanically stirred 1.3 mol/l
acetate buffer solution. Synthesizing temperature was 60, and the pH was 7.4.

其中提到的 acetate buffer solution 既醋酸盐缓冲液它的pH是7.4的，一直没能找到它的配方，望各位高手前来指点。

[ Last edited by zhangwj on 2011-5-16 at 20:46 ]

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1楼 2009-09-04 10:26:22

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yangliqiang

银虫 (小有名气)

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薰衣草儿(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 10-20 19:01

常用缓冲溶液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升
pH X Y pH X Y
2.0
2.4
2.6
2.8 50
50
50
50 44.0
32.4
24.2
16.8 3.0
3.2
3.4
3.6 50
50
50
50 11.4
8.2
6.4
5.0
甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）
X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升
pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0 5
5
5
5
5 4.070
3.960
3.295
2.642
2.022 3.2
3.4
3.6
3.8 5
5
5
5 1.470
0.990
0.597
0.263
邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH 0.2mol/L Na2HPO4
（毫升） 0.1mol/L
柠檬酸
（毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4
（毫升） 0.1mol/L
柠檬酸
（毫升）
2.2
2.4
2.6
2.8
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8
5.0 0.40
1.24
2.18
3.17
4.11
4.94
5.70
6.44
7.10
7.71
8.28
8.82
9.35
9.86
10.30 10.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70 5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0 10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45 9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子量 = 141.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7•H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH 钠离子浓度
（mol/L）柠檬酸（克）
C6H8O7•H2O 氢氧化钠(克)
NaOH 97% 盐酸（毫升）
HCl（浓）最终体积（升）①
2.2
3.1
3.3
4.3
5.3
5.8
6.5 0.20
0.20
0.20
0.20
0.35
0.45
0.38 210
210
210
210
245
285
266 84
83
83
83
144
186
156 160
116
106
45
68
105
126 10
10
10
10
10
10
10
①    使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）
pH 0.1 mol/L
柠檬酸
（毫升） 0.1 mol/L
柠檬酸钠
（毫升） pH 0.1 mol/L
柠檬酸
（毫升） 0.1 mol/L
柠檬酸钠
（毫升）
3.0
3.2
3.4
3.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6
4.8 18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
11.4
10.3
9.2 1.4
2.8
4.0
5.1
6.0
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8 5.0
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6 8.2
7.3
6.4
5.5
4.7
3.8
2.8
2.0
1.4 11.8
12.7
13.6
14.5
15.3
16.2
17.2
18.0
18.6
柠檬酸C6H8O7•H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7•2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）

pH(18℃) 0.2 mol/L
  NaAc
(毫升) 0.3 mol/L
HAc
(毫升)
pH(18℃) 0.2 mol/L
NaAc
(毫升) 0.3 mol/L
HAc
(毫升)
2.6
3.8
4.0
4.2
4.4
4.6 0.75
1.20
1.80
2.65
3.70
4.90 9.25
8.80
8.20
7.35
6.30
5.10 4.8
5.0
5.2
5.4
5.6
5.8 5.90
7.00
7.90
8.60
9.10
9.40 4.10
3.00
2.10
1.40
0.90
0.60
Na2Ac•3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液
（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）

pH 0.2 mol/L
Na2HPO4
(毫升) 0.3 mol/L
NaH2PO4
(毫升)
pH 0.2 mol/L
Na2HPO4
(毫升) 0.3 mol/L
NaH2PO4
(毫升)
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9 8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49.5
55.0 92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
  56.5
51.0
45.0 7.0
7.1
7.2
7.3
7.4
7.5
7.6
7.7
7.8
7.9
8.0 61.0
67.0
72.0
77.0
81.0
84.0
87.0
89.5
91.5
93.0
94.7 39.0
33.0
28.0
23.0
19.0
16.0
13.0
10.5
8.5
7.0
5.3
Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4•12H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）
pH mol/L/15Na2HPO4
(毫升) mol/L//15KH2PO4
(毫升) pH mol/L//15Na2HPO4
(毫升) mol/L//15KH2PO4
(毫升)
4.92
5.29
5.91
6.24
6.47
6.64
6.81
6.98 0.10
0.50
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00 9.90
9.50
9.00
8.00
7.00
6.00
5.00
4.00 7.17
7.38
7.73
8.04
8.34
8.67
8.18 7.00
8.00
9.00
9.50
9.75
9.90
10.00 3.00
2.00
1.00
0.50
0.25
0.10
0
Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。

8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升
pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） pH(20℃) X (毫升) Y（毫升）
5.8
6.0
6.2
6.4
6.6
6.8 5
5
5
5
5
5 0.372
0.570
0.860
1.260
1.780
2.365 7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0 5
5
5
5
5
5 2.963
3.500
3.950
4.280
4.520
4.680

9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）
pH 0.04M巴比妥钠溶液 0.2V盐酸 pH 0.04M巴比妥钠溶液(毫升) 0.2N盐酸(毫升)
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
8.2 100
100
100
100
100
100
100
100 18.4
17.8
16.7
15.3
13.4
11.47
9.39
7.21 8.4
8.6
8.8
9.0
9.2
9.4
9.6 100
100
100
100
100
100
100
100 5.21
3.82
2.52
1.65
1.13
0.70
0.35
巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升

10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
pH X(毫升) pH X(毫升)
7.10
7.20
7.30
7.40
7.50
7.60
7.70
7.80
7.90
8.00 45.7
44.7
43.4
42.0
40.3
38.5
36.6
34.5
32.0
29.2 8.10
8.20
8.30
8.40
8.50
8.60
8.70
8.80
8.90 26.2
22.9
19.9
17.2
14.7
12.4
10.3
8.5
7.0
三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH
                           C
HOCH2 NH2
分子量=121.14;
0. 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。

11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼砂（毫升） pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼酸（毫升）
7.4
7.6
7.8
8.0 1.0
1.5
2.0
3.0 9.0
8.5
8.0
7.0 8.2
8.4
8.7
9.0 3.5
4.5
6.0
8.0 6.5
5.5
4.0
2.0
硼砂Na2B4O7•H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼酸（毫升） pH 0.05M硼砂（毫升） 0.2M硼酸（毫升）
7.4
7.6
7.8
8.0 1.0
1.5
2.0
3.0 9.0
8.5
8.0
7.0 8.2
8.4
8.7
9.0 3.5
4.5
6.0
8.0 6.5
5.5
4.0
2.0
硼砂Na2B4O7•10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H2BO3，分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升
pH X Y pH X Y
8.6
8.8
9.0
9.2
9.4 50
50
50
50
50 4.0
6.0
8.8
12.0
16.8 9.6
9.8
10.0
10.4
10.6 50
50
50
50
50 22.4
27.2
32.0
38.6
45.5
甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。

13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）
X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升
pH X Y pH X Y
9.3
9.4
9.6 50
50
50 6.0
11.0
23.0 9.8
10.0
10.1 50
50
50 34.0
43.0
46.0
硼砂Na2B4O7•10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。

14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
pH 0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升)
20℃ 37℃
9.16
9.40
9.51
9.78
9.90
10.14
10.28
10.53
10.83 8.77
9.12
9.40
9.50
9.72
9.90
10.08
10.28
10.57 1
2
3
4
5
6
7
8
9 9
8
7
6
5
4
3
2
1
Na2CO2•10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。

15．“PBS”缓冲液
PH 7.6 7.4 7.2 7.0
H2O
NaCl
Na2HPO4
NaH2PO4 1000
8.5
2.2
0.1 1000
8.5
2.2
0.2 1000
8.5
2.2
0.3 100ml
8.5g
2.2g
0.4g

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知识改变命运

12楼2009-10-20 18:45:14

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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无知者6096

金虫 (著名写手)

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薰衣草儿(金币+0,VIP+0):鼓励新虫子~ 9-4 18:18
caobin216(金币+1,VIP+0):不错，比较翔实，能给出出处吗？ 9-4 19:38
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):鼓励新虫子（补上）~ 9-4 22:46
swjtumick(金币+2,VIP+0): 9-5 15:58

英文是醋酸盐缓冲液。你说的是磷酸盐缓冲液？磷酸盐缓冲液的配制
磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）
试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）
pH  0.2mol/L NaH2PO4(ml)  0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7       93.5                   6.5
5.8       92.0                   8.0
5.9       90.0                   10.0
6.0       87.7                   12.3
6.1       85.0                   15.0
6.2       81.5                   18.5
6.3       77.5                   22.5
6.4       73.5                   26.5
6.5       68.5                   31.5
6.6       62.5                   37.5
6.7       56.5                   43.5
6.8       51.0                   49.0
6.9       45.0                   55.0
7.0       39.0                   61.0
7.1       33.0                   67.0
7.2       28.0                   72.0
7.3       23.0                   67.0
7.4       19.0                   81.0
7.5       16.0                   84.0
7.6       13.0                   87.0
7.7       10.5                   89.5
7.8          8.5                   91.5
7.9          7.0                   93.0
8.0          5.3                   94.7

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2楼2009-09-04 18:11:07

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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

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专业: 食品科学

薰衣草儿(金币+0,VIP+0)::) 9-4 22:46
caobin216(金币+0,VIP+0):谢谢提醒，我主要做材料的，生化不怎么了解，见谅 9-5 17:14

不错，比较翔实，能给出出处吗？

PS：一般生化的实验书上都是有的啊

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3楼2009-09-04 21:08:59

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liugan

银虫 (小有名气)

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性别: GG
专业: 药剂学

从Google上收索buffer design就有各种各样的配方~~

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飘散的风

4楼2009-09-04 23:29:39

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