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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】等度不能将目标物洗脱，不是死时间出峰，就是不出峰，什么原因？
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flyingwings

[交流] 【求助】等度不能将目标物洗脱，不是死时间出峰，就是不出峰，什么原因？

实验中发现等度不能将目标物洗脱，不是死时间出峰，就是不出峰，而梯度洗脱却可以调整保留时间，这样是不是不合理呢？梯度：0-10min，20%乙腈+80%水（含0.05%TFA）------45%乙腈+55%水（含0.05%TFA）,出峰时间在六分钟左右，减去空白，标准品有两个峰，且峰高相当（标准品是新买的，进口的），难道标准品污染了？等度的条件试了很多，不是不出峰，就是死时间出峰，为什么呢？请教各位了！谢谢！
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1楼 2009-09-04 09:28:16
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天蝎玫瑰

铜虫 (初入文坛)
★
flyingwings(金币+1):谢谢参与
梯度洗脱出峰，说明在梯度过程里有最适合出峰的流动相比例。等度条件可能没有设对比例。可以通过计算梯度出峰的时候估计出峰时流动相的比例，然后配制等度条件，但是应该没有梯度情况下柱效高。
楼主的意思是不是等度不出峰，梯度标准品出两个峰啊？如果样品只有一个峰，说明标准品分解或者污染了，如果样品也两个峰，可能流动相不合适，试试调节PH。
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花开无声，雪落有痕。
4楼2009-09-04 10:09:22
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
★
flyingwings(金币+1):谢谢参与
这个帖子不应该求助，感觉经验贴比较合适！梯度是逐步改变洗脱条件的一种洗脱方式，楼主显然找到了适合的分析方法，另外觉得应该相信自己，怎么会色谱条件好了又考虑标准品纯度了呢？除非有文献说此类标准品不可能那样出峰！！
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我为新生
2楼2009-09-04 09:55:16
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yxy90

木虫 (正式写手)
★
flyingwings(金币+1):谢谢参与
有没有可能是进样量（浓度等）比较大，进样阀处有残留，相当于二次进样，所以出两个峰呀。色谱条件用梯度主要是平衡柱子很麻烦，其他没什么，用梯度挺好的。

[ Last edited by yxy90 on 2009-9-4 at 10:02 ]
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3楼2009-09-04 10:00:57
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zhangsibao

木虫 (正式写手)

回复楼主

★
flyingwings(金币+1):谢谢参与
建议楼主看看有关色谱分析方面的书籍。搞明白梯度洗脱的含义再说。你的实验过程就是证明了梯度的含义就是增强样品组分的洗脱能力。有些样品只能采用梯度洗脱的方式来增加分离度，以期得到较好的峰形，从而有较好的定量分析结果。
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5楼2009-09-04 12:26:38
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