应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助有关黑曲霉原生质体的转化
汕头大学海洋科学接受调剂
81/1返回列表
查看: 853  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

beibei3372

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助有关黑曲霉原生质体的转化

最近一直在做黑曲霉的原生质体，用于重组质粒的转化，只是一直没有转化子的长出……
试过不少条件的优化却仍然没有起色，分析后还是觉得是原生质体的质量问题。
期待各位高手给予指点，非常感谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-09-03 15:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyyy

无虫 (正式写手)
★
beibei3372(金币+1,VIP+0):谢谢你 9-8 09:18
用察氏培养基养菌丝,比较嫩的,然后用蜗牛酶破壁....梯度离心后收集原生质体
赞一下(6人) 回复此楼
2楼2009-09-08 08:51:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beisimai895

木虫 (小有名气)
用什么做筛选标记的？
赞一下 回复此楼
3楼2009-09-08 09:10:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beibei3372

金虫 (初入文坛)

可以详细一点吗

引用回帖:
Originally posted by chenyyy at 2009-9-8 08:51:
用察氏培养基养菌丝,比较嫩的,然后用蜗牛酶破壁....梯度离心后收集原生质体

我养菌丝用的不是察氏培养基，就是普通的YG培养基，长得也不错。比较嫩的菌丝是通过什么来判断的呢？梯度离心可以具体一些吗？我老早试过，效果不行……
谢了哈！
赞一下 回复此楼
4楼2009-09-08 09:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
原生质体再生率测了吗？电击可以试试！！
赞一下 回复此楼
细推物理须行乐。
5楼2009-09-08 09:22:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beibei3372

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by beisimai895 at 2009-9-8 09:10:
用什么做筛选标记的？

是以乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶(pyrG)基因作为标志基因，乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶是尿嘧啶核苷酸合成中一种关键性酶，缺乏该酶的pyrG缺陷株不能在不含尿嘧啶核苷的培养基上生长。通过基因转化，向其导入含pyrG基因的质粒，可使其获得在不含尿嘧啶核苷培养基上生长的能力。
赞一下 回复此楼
6楼2009-09-08 09:22:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beibei3372

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lauren180 at 2009-9-8 09:22:
原生质体再生率测了吗？电击可以试试！！

再生率没测具体的，只是平行对照时完全培养基里的长了，缺陷型培养基里的没有长……
谢了哈！
赞一下 回复此楼
7楼2009-09-08 09:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyyy

无虫 (正式写手)
★
beibei3372(金币+1,VIP+0):谢谢你 9-8 15:42
引用回帖:
Originally posted by beibei3372 at 2009-9-8 09:18:

我养菌丝用的不是察氏培养基，就是普通的YG培养基，长得也不错。比较嫩的菌丝是通过什么来判断的呢？梯度离心可以具体一些吗？我老早试过，效果不行……
谢了哈！

我在察示培养基上放了一层称量纸(更有利于收集菌丝体),然后涂布甘油,甘油可以让菌体长得更慢些

划线接种...这样长出来的菌丝体很白..较嫩..时间不到一天吧(具体时间忘了)

[ Last edited by chenyyy on 2009-9-8 at 14:47 ]
赞一下(6人) 回复此楼
8楼2009-09-08 14:46:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 beibei3372 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工学 309分求调剂 +11 Yin DY 2026-04-08 11/550 2026-04-14 12:55 by fqwang
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +13 电气李 2026-04-13 14/700 2026-04-14 08:50 by 木木mumu～
[考研] 300分求调剂 （085501机械专硕，本科扬大） +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu～
[考研] 考研调剂 +11 长弓傲 2026-04-13 12/600 2026-04-13 22:48 by pies112
[考研] 求调剂 +11 何气正 2026-04-13 12/600 2026-04-13 20:14 by 学员JpLReM
[考研] 复试调剂 +17 积极向上； 2026-04-10 19/950 2026-04-13 19:53 by 闲人终南山
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 2本，初试303，0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线，员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 专硕085403，291分，有两篇专利，一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭