24小时热门版块排行榜    

查看: 714  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zuiainaruto

新虫 (初入文坛)

[交流] 有关ELISA的问题

最近在做ELISA,蛋白为重组蛋白,17KD左右,其阳性结果很低,与阴性结果差不多,但是另外做免疫印迹却做的出来。所以想请教一下有经验的高手,问题大概出在哪?会不会是蛋白活性的问题?该注意哪些地方?谢谢!
还有,如果先使蛋白变性,在做ELISA,这样可以吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

汪洋孤舟


zuiainaruto(金币+1,VIP+0): 10-14 23:31
1、包被抗体和酶标抗体是多抗的话,蛋白变不变性,对ELISA结果没有影响
2、如果用的是单抗,可能捉不住抗原,对结果有影响
3、采用棋盘滴定确定检测条件,然后检测
7楼2009-09-15 21:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

zuiainaruto

新虫 (初入文坛)

请大虾们指点迷津~~

[ Last edited by zuiainaruto on 2009-9-7 at 09:49 ]
3楼2009-09-03 18:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ellar

铜虫 (小有名气)

这个跟变性没有关系,你想检测你的蛋白,包板肯定用的是抗这个蛋白的抗体,蛋白与抗体结合后再与标记抗体结合,最后显色,即是双抗体夹心法,抗体可以与变性和非变性的蛋白结合,只要其抗原表位在,就会结合,跟变性没有关系.
4楼2009-09-15 08:52:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxi8579

铜虫 (正式写手)

ELISA的功能在于测定空间表位,蛋白质没有变性。免疫印迹即WESTEN-blotting在于测定线性表位,蛋白质被变性。我想应该和变性有点关系吧。
5楼2009-09-15 09:35:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:52 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见