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Long777768

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 30937747 at 2012-08-03 20:33:48
难道大家用的都是Red/ET同源重组?两端各带50bp就可以啦,设计在引物里,我一直都是这样做的。
或者采用常规的,一般是两端各1000bp

您好!我最近在做red的同源重组,两步法插入我的目的片段,第二步老是不成功,步骤如下:1:PCR的方法将同源臂扩增到galk基因序列上,将带有同源臂galk基因插入到IE2基因  2:将第一步的同源臂PCR扩增到我的目的片段上,将带有同源臂的目的片段替换掉带有同源臂galk基因,这样就将带有同源臂的目的片段插入到IE2基因 ,同源臂大小50BP,是IE2基因上的50bpde 序列,第二步总是失败,麻烦您提提建议,非常
11楼2018-04-23 21:05:06
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