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肠激酶切割后小肽的纯化
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PET32a融合硫氧还蛋白表达,我的目的肽等电点是10.58, 融合蛋白等电点是7.08 ,融合蛋白(20KD)已经成功纯化和切割,用肠激酶切割体系为50ul,想再纯化出切下的多肽(2.3KD),请问用什么方法比较合适?需要用到层析仪吗? HIS 柱(这个还需要脱盐,感觉不太好) Q柱(倾向于用这个,但是不知道上样500ul的话需要几毫升洗脱液洗脱,应该不用脱盐了吧?也不用层析仪吧?) sephadex g25柱 (这个根据分子量来分离,似乎也可以,但是不知道具体的操作方法) 恳请指点!谢谢。 |
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