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樱桃小丸子1627

新虫 (初入文坛)

[交流] 肠激酶切割后小肽的纯化

PET32a融合硫氧还蛋白表达,我的目的肽等电点是10.58, 融合蛋白等电点是7.08 ,融合蛋白(20KD)已经成功纯化和切割,用肠激酶切割体系为50ul,想再纯化出切下的多肽(2.3KD),请问用什么方法比较合适?需要用到层析仪吗?

HIS 柱(这个还需要脱盐,感觉不太好)
Q柱(倾向于用这个,但是不知道上样500ul的话需要几毫升洗脱液洗脱,应该不用脱盐了吧?也不用层析仪吧?)
sephadex g25柱 (这个根据分子量来分离,似乎也可以,但是不知道具体的操作方法)

恳请指点!谢谢。
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
50ul的体系不用层析仪是不可能的
最保险的办法是SEC
2楼2009-08-30 20:01:18
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
搞不懂既然表达,你表达这么点干嘛啊?
多表达一点不是操作方便吗?哪怕失败了也可以重来啊。
生物资源交流QQ群:1044518333
3楼2009-08-30 21:42:16
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