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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主

[交流] 做过克隆的XDJM进来看看,如何减少涂布棒的烧烫次数?

刚刚涂布了8个平板,
发现等待烧烫的涂布棒冷却下来确实是件很烦躁的事  
大家做克隆,是不是都是烧一次只涂布一个平板,能不能连续涂两个或多个?
做简单的克隆(质粒双酶切+PCR产物),一般我都做5个平板:
1.阳性对照(未酶切的质粒);
2.酶连产物(酶切质粒:PCR产物=1:1);
3.酶连产物(酶切质粒:PCR产物=3:1);
4.酶连产物(酶切质粒,自连对照);
5.阴性对照(什么也不转)。

请问:这样的情况最少要烧几次涂布棒?顺序是怎样(序号表示)?理由?
其实,我已经有想法了 看看和大家想的一样不?
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从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
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gandalf886

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你涂那么多干嘛,浪费
一个简单的克隆何必搞得这么复杂
16楼2009-09-01 14:30:26
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查看全部 17 个回答

695

木虫 (职业作家)


houjinglhy(金币+1,VIP+0):谢谢 8-29 20:35
烧一次涂一次啊,放在边上让它慢慢凉就是了啊,我平时只做3;1的、
2楼2009-08-28 21:56:51
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-29 08:11
houjinglhy(金币+1,VIP+0):这个是好方法 呵呵 谢了 8-29 20:34
当然每次都烧了 而且不少于2分钟,经常有一起涂很多板的时候,多准备几个就好了,准备4,5 个,涂完 烧完 放着,用下一个,再涂,再烧,再放,再用下一个,等5个都用完了,第一个也凉了。
3楼2009-08-29 00:30:10
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-29 08:11
houjinglhy(金币+2,VIP+0):这个跟我想法最相近,我的做法是5,4,2,3,1 只烧一次 哈 你再仔细想想这样可以不 哈 8-29 20:32
是我的话烧两次玻璃棒:烧一次,5,4;然后烧一次,2,3,1

当然,涂布完后再烧一次。

楼主聪明人,理由我想楼主应该可以想到吧。

[ Last edited by brightfuture01 on 2009-8-29 at 01:47 ]
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-08-29 00:33:35
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