24小时热门版块排行榜    

查看: 574  |  回复: 0
【悬赏金币】回答本帖问题,作者啊咩将赠送您 5 个金币

啊咩

新虫 (初入文坛)

[求助] 使用EGFP r引物加自身上游引物P不出来,35S加自身上下游引物能P出来是怎么回事呢

虫友们,有问题求助,
是这样的,我构建载体,连终载体验证的时候用的35S和自身下游进行PCR验证,都有条带我就继续做了(其实这里送去测序就发现35S方向的测序都有结果,egfp测序的结果都出不来,所以我中间设计引物加测,得出结果是序列正确也有EGFP部分),然后终载体转农杆菌验证的时候用egfp和35S进行菌P,P不出来,然后我做了35s加自身下游以及自身上游加egfpR的菌P,前者都有条带且正确,后者都无条带,连质粒也无结果。想求问这是什么情况呢?
egfp引物应该是没问题的,因为我把别人的质粒做模板P了一下能出条带,终载体质粒应该也没问题,和我用同一管终载体质粒的同学已经完成了构建,现在这个问题不是我特有,另外一个师姐有这个问题,egfp加自身上游引物P不出来。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 啊咩 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 12/600 2026-03-14 17:42 by pyaop2016
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 269求调剂 +4 朔朔话 2026-03-08 5/250 2026-03-14 04:43 by JourneyLucky
[考研] 0831生医工307分 求调剂 +3 小小怪wx 2026-03-08 3/150 2026-03-14 03:36 by JourneyLucky
[考研] 313分生物学求调剂 +6 Yyt杨1 2026-03-09 8/400 2026-03-14 03:00 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +6 yfihxh 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:18 by JourneyLucky
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +4 Ncdx123456 2026-03-13 4/200 2026-03-13 10:32 by houyaoxu
[考研] 289求调剂 +4 步川酷紫123 2026-03-11 4/200 2026-03-11 19:41 by peike
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
信息提示
请填处理意见