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xiaoshaozi

新虫 (初入文坛)

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虫号: 693769
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专业: 临床药理

[交流] 这样的样本能提出DNA吗

我们医院收集一些病人血样处理如下：肝素抗凝的全血离心5分钟，提取上清液保留一管，剩余的用生理盐水洗2变，每洗一遍离心一次，上清液不要，最后吸一管红细胞
现在老师想分析基因多态，要提DNA ，我觉得白细胞都被洗掉了，提不出来，哪位高手指点下，这样处理过的样本无论是血浆还是红细胞管中能提出DNA吗？

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:02 ]

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1楼 2009-08-27 15:22:16

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leirihua

铜虫 (小有名气)

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专业: 细胞信号转导

★
xiaoshaozi(金币+1,VIP+0): 9-1 20:45

这样处理细胞膜没有破，细胞内容物不能释放出来，离心就不能得到dna。白细胞有细胞核，从中可提取到dna和白细胞线粒体DNA(mtDNA)（方法抗凝血静置后取白细胞层,采用碱变性法裂解细胞,酚/氯仿/异戊醇抽提,RNA酶消化后再抽提及沉淀,PCR扩增产物电泳鉴定.结果获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染,用特异性mtDNA PCR引物从核酸样品中均能扩增得到mtDNA基因片段）。