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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 这样的样本能提出DNA吗
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xiaoshaozi

新虫 (初入文坛)

[交流] 这样的样本能提出DNA吗

我们医院收集一些病人血样处理如下：肝素抗凝的全血离心5分钟，提取上清液保留一管，剩余的用生理盐水洗2变，每洗一遍离心一次，上清液不要，最后吸一管红细胞
  现在老师想分析基因多态，要提DNA ，我觉得白细胞都被洗掉了，提不出来，哪位高手指点下，这样处理过的样本无论是血浆还是红细胞管中能提出DNA吗？

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:02 ]
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1楼 2009-08-27 15:22:16
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
xiaoshaozi(金币+1,VIP+0): 9-1 20:46
提血液中的DNA，应该就是白细胞中的DNA。
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2楼2009-08-27 17:42:41
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
当然能够替出来，大部分dna都在离心管下面，没有被废弃掉！
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
3楼2009-08-27 17:47:25
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xiaoshaozi

新虫 (初入文坛)
就是不知道这样处理过还能剩有白细胞吗
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4楼2009-08-28 09:23:34
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leirihua

铜虫 (小有名气)
★
xiaoshaozi(金币+1,VIP+0): 9-1 20:45
这样处理细胞膜没有破，细胞内容物不能释放出来，离心就不能得到dna。白细胞有细胞核，从中可提取到dna和白细胞线粒体DNA(mtDNA)（方法 抗凝血静置后取白细胞层,采用碱变性法裂解细胞,酚/氯仿/异戊醇抽提,RNA酶消化后再抽提及沉淀,PCR扩增产物电泳鉴定.结果获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染,用特异性mtDNA PCR引物从核酸样品中均能扩增得到mtDNA基因片段）。
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5楼2009-08-28 10:00:36
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xiaoshaozi

新虫 (初入文坛)
我没有血样了 这些都是以前収来就这么处理的了   如果这样处理提不出DNA 就不用做这个课题了
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6楼2009-08-28 23:41:33
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hxw2009

银虫 (小有名气)
★
xiaoshaozi(金币+1,VIP+0): 9-1 20:45
你用多少转离心的？白细胞可能没有被洗掉，还混在红细胞中
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7楼2009-08-29 09:31:13
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xiaoshaozi

新虫 (初入文坛)
2000转离心的   不知道离好后白细胞是否在红细胞上面  还是和红细胞混匀的，因为离好后就从管里的中部吸了一管留EP管里   其余的就扔了   不知道这一管有没有吸到白细胞
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8楼2009-08-29 10:31:54
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