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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎么在SDS-PAGE电泳中分开两个差15个氨基酸的蛋白
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)

[交流] 怎么在SDS-PAGE电泳中分开两个差15个氨基酸的蛋白

我们有2个蛋白，分子量大概是36KD，一个是在N端多出15个氨基酸，在跑SDS-PAGE电泳时两个蛋白分不开，请问有什么好方法能让2个蛋白分开？谢谢！

[ Last edited by amisking on 2010-3-6 at 20:35 ]
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1楼 2009-08-27 11:21:39
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yang0071

木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-27 11:27
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-27 11:49
用12％的胶
时间跑长的就是了
15个aa还分不开才怪
赞一下(12人) 回复此楼
2楼2009-08-27 11:25:09
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xinlai

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-27 11:29
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-27 11:49
增加胶浓度，
延长电泳时间。
赞一下(12人) 回复此楼
3楼2009-08-27 11:26:37
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2009-8-27 11:25:
用12％的胶
时间跑长的就是了
15个aa还分不开才怪

谢谢，你认为12％还是15%的胶浓度有利于分开？
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4楼2009-08-27 11:29:11
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jessica533

新虫 (小有名气)
★
jiang_jjd(金币+1,VIP+0): 8-28 09:24
15%的好一点，15aa还是不容易分开的，电泳时间尽量长一点
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把忧愁微掉，将快乐积起。
5楼2009-08-27 15:04:37
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yang0071

木虫 (职业作家)
★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-28 09:24
引用回帖:
Originally posted by jiang_jjd at 2009-8-27 11:29:


谢谢，你认为12％还是15%的胶浓度有利于分开？

你先用12％的跑，如果还分不开 再用15％的
还有要注意的是，上样量不要太多，太多了会导致你条带太粗，看上去就没分开
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6楼2009-08-27 15:23:03
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-28 09:25
36KDa ，在15AA差别时，估计相差1.6KDa左右，跑12-15%的胶，为平常电泳时间的2倍（即70min*2），使小分子蛋白跑出，可以分得很清楚的。我用的就是北京六一小型蛋白电泳装置，没问题。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
7楼2009-08-27 15:30:40
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
jiang_jjd(金币+1,VIP+0): 8-28 09:25
减少点样量
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8楼2009-08-27 16:34:31
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)
★
jiang_jjd(金币+1,VIP+0): 8-28 09:27
用双向电泳，呵呵。
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9楼2009-08-27 19:31:31
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louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主
★
jiang_jjd(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by xinlai at 2009-08-27 11:26:37:
增加胶浓度，
延长电泳时间。

同意
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10楼2010-03-06 20:21:26
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