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汕头大学海洋科学接受调剂
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)

[交流] 怎么在SDS-PAGE电泳中分开两个差15个氨基酸的蛋白

我们有2个蛋白,分子量大概是36KD,一个是在N端多出15个氨基酸,在跑SDS-PAGE电泳时两个蛋白分不开,请问有什么好方法能让2个蛋白分开?谢谢!

[ Last edited by amisking on 2010-3-6 at 20:35 ]
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yang0071

木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-27 11:27
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-27 11:49
用12%的胶
时间跑长的就是了
15个aa还分不开才怪
2楼2009-08-27 11:25:09
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xinlai

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-27 11:29
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-27 11:49
增加胶浓度,
延长电泳时间。
3楼2009-08-27 11:26:37
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2009-8-27 11:25:
用12%的胶
时间跑长的就是了
15个aa还分不开才怪

谢谢,你认为12%还是15%的胶浓度有利于分开?
4楼2009-08-27 11:29:11
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jessica533

新虫 (小有名气)


jiang_jjd(金币+1,VIP+0): 8-28 09:24
15%的好一点,15aa还是不容易分开的,电泳时间尽量长一点
把忧愁微掉,将快乐积起。
5楼2009-08-27 15:04:37
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yang0071

木虫 (职业作家)

★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-28 09:24
引用回帖:
Originally posted by jiang_jjd at 2009-8-27 11:29:


谢谢,你认为12%还是15%的胶浓度有利于分开?

你先用12%的跑,如果还分不开 再用15%的
还有要注意的是,上样量不要太多,太多了会导致你条带太粗,看上去就没分开
6楼2009-08-27 15:23:03
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-28 09:25
36KDa ,在15AA差别时,估计相差1.6KDa左右,跑12-15%的胶,为平常电泳时间的2倍(即70min*2),使小分子蛋白跑出,可以分得很清楚的。我用的就是北京六一小型蛋白电泳装置,没问题。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
7楼2009-08-27 15:30:40
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


jiang_jjd(金币+1,VIP+0): 8-28 09:25
减少点样量
8楼2009-08-27 16:34:31
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)


jiang_jjd(金币+1,VIP+0): 8-28 09:27
用双向电泳,呵呵。
9楼2009-08-27 19:31:31
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louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主


jiang_jjd(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by xinlai at 2009-08-27 11:26:37:
增加胶浓度,
延长电泳时间。

同意
10楼2010-03-06 20:21:26
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