应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白诱导
52/1返回列表
查看: 2753  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Apfel

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白诱导 已有2人参与

我的目的基因的大小事1200多，克隆载体测序，表达载体测序都没有问题，可是用IPTG诱导的时候就是没有目的条带出来，我的载体是PET-21，诱导的条件是：37°C，IPTG浓度是1mM，做了好多次了，就是没有目的条带的出现。很着急，希望大家能给分析一下，感激涕零，不胜切切。

[ Last edited by Apfel on 2009-8-26 at 21:36 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-08-26 21:31:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王司机师傅

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by gogen at 2009-08-26 23:36:12
IPTG浓度要做个梯度实验,然后看看,把沉淀跑一下看看是不是都包涵体了...如果是的,那么,降温吧,可以考虑OD0.8,然后15度诱导表达这个秘籍,哈哈至于南农大的4度诱导表达的葵花宝典我就不说了真核的吗?真核的不少是 ...

15度诱导多久呢？
赞一下 回复此楼
11楼2019-03-22 11:07:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
难道全部是包涵体形式存在的？
这样试试看，我一般是这么诱导的：
37度摇到 OD600=0.6。然后加入0.1mM 和1.0mM ,同时摇两瓶，这时候的温度换成25-30度之间的某个都可以。还没有跑SDS-PAGE没有出来条带的时候呢。

祝好运
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2009-08-26 22:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般这个条件诱导不出来，就要考虑换载体了
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-08-26 22:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apfel

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by Apfel at 2009-8-26 21:31:
我的目的基因的大小事1200多，克隆载体测序，表达载体测序都没有问题，可是用IPTG诱导的时候就是没有目的条带出来，我的载体是PET-21，诱导的条件是：37°C，IPTG浓度是1mM，做了好多次了，就是没有目的条带的出现 ...

我试一下吧，谢谢。
回复此楼
4楼2009-08-26 23:04:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭