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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » RNA与DNA杂交实验
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王小木南

新虫 (小有名气)

[求助] RNA与DNA杂交实验

求助做过单链DNA与RNA杂交的小伙伴，他们的杂交需要额外的条件么。我们实验室经常做DNA分子的杂交，只要体系中有互补片段，他们的杂交是非常容易的，不知道DNA与RNA杂交需要什么条件呢

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2021-12-25 18:35:11
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王小木南

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 明月千古 at 2021-12-26 14:15:20
是的，杂交温度要看你的目的要求，如果特异性，灵敏度没要求那常温当然也可以杂交，另外杂交缓冲液是需要的，还应加上RNase block

非常感谢您的赐教，我是要做特异性鉴别的，灵敏度当然也是越高越好，为了降低非特异杂交，是不是要尽量提高杂交温度呢，另外杂交缓冲液一般都用什么呢～

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5楼2021-12-26 15:17:02
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明月千古

木虫 (著名写手)
DNA95℃变性后，降到65℃再加RNA进行杂交

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2楼2021-12-25 19:37:31
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王小木南

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 明月千古 at 2021-12-25 19:37:31
DNA95℃变性后，降到65℃再加RNA进行杂交

您好，DNA 95℃变性是为了解旋成单链么，DNA与RNA的杂交是一定要在65℃下才能发生么（因为DNA与DNA的杂交在室温下瞬间就可以实现呢），另外需要额外的杂交缓冲液么，感谢您的赐教～

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3楼2021-12-26 11:45:26
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明月千古

木虫 (著名写手)
是的，杂交温度要看你的目的要求，如果特异性，灵敏度没要求那常温当然也可以杂交，另外杂交缓冲液是需要的，还应加上RNase block

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4楼2021-12-26 14:15:20
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