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RNA与DNA杂交实验
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【悬赏金币】回答本帖问题,作者王小木南将赠送您 10 个金币
王小木南
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[
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]
RNA与DNA杂交实验
求助做过单链DNA与RNA杂交的小伙伴,他们的杂交需要额外的条件么。我们实验室经常做DNA分子的杂交,只要体系中有互补片段,他们的杂交是非常容易的,不知道DNA与RNA杂交需要什么条件呢
@
biostar2009
@
飞约疯人院
@
wizardfan
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youlinglyw
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1楼
2021-12-25 18:35:11
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明月千古
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DNA95℃变性后,降到65℃再加RNA进行杂交
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2楼
2021-12-25 19:37:31
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王小木南
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2楼
:
Originally posted by
明月千古
at 2021-12-25 19:37:31
DNA95℃变性后,降到65℃再加RNA进行杂交
您好,DNA 95℃变性是为了解旋成单链么,DNA与RNA的杂交是一定要在65℃下才能发生么(因为DNA与DNA的杂交在室温下瞬间就可以实现呢),另外需要额外的杂交缓冲液么,感谢您的赐教~
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3楼
2021-12-26 11:45:26
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明月千古
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是的,杂交温度要看你的目的要求,如果特异性,灵敏度没要求那常温当然也可以杂交,另外杂交缓冲液是需要的,还应加上RNase block
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4楼
2021-12-26 14:15:20
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王小木南
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4楼
:
Originally posted by
明月千古
at 2021-12-26 14:15:20
是的,杂交温度要看你的目的要求,如果特异性,灵敏度没要求那常温当然也可以杂交,另外杂交缓冲液是需要的,还应加上RNase block
非常感谢您的赐教,我是要做特异性鉴别的,灵敏度当然也是越高越好,为了降低非特异杂交,是不是要尽量提高杂交温度呢,另外杂交缓冲液一般都用什么呢~
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5楼
2021-12-26 15:17:02
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2021-12-28 10:15:44
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