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关于样品中表面活性剂的去除
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之前一直使用尿素硫脲来裂细胞提取蛋白,有时候裂解蛋白会用到SDS助溶,但是由于后面要上质谱分析所以这些表面活性剂要去除。 常规的SDS由于会缠绕包裹在蛋白上所以用超滤的方法去除比较困难,通常要用8M盐酸胍或者高浓度尿素变性后超滤去除,最常用的是通过沉淀去除, 但是沉淀的问题就是损失会比较大,而且再复溶的话可能又需要加表面活性剂。 今天一个师兄告诉我NP40这种非离子型的表面活性剂可以直接通过超滤除去,我一直以为表面活性剂性质都差不多是在蛋白表面形成包被, 求问有没有类似的文献支持或者是实验经历,关于不同表面活性剂的去除和对蛋白的影响 [ 发自手机版 https://muchong.com/3g ] |
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