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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 透明质酸抑制率实验样品组和空白对照都显色？
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susu1014

新虫 (著名写手)

[交流] 透明质酸抑制率实验样品组和空白对照都显色？

实验方法：采用 Elson-Morgan 改良法测定一系列浓度（1-4mg/mL）的样品与透明质酸酶的作用，1、2 号试管( 0.5 mL 样品溶液和 0.5 mL 浓度 600 U/mL 透明质酸酶) ，3、4 号试管( 0.5 mL 蒸馏水和 0.5 mL 醋酸缓冲液) ，37 ℃保温 20 min；加入 0.1 mL ( 2.5 mol/L) 氯化钙溶液， 37 ℃保温 20 min；1、3 号试管中加入 0.5 mL 0.5 mg/mL 的透明质酸钠，2、 4 号试管中加入 0.5 mL 醋酸缓冲液，37 ℃保 温 40 min；室温放置 10 min，加入 0.5 mL 乙酰丙酮溶液( 3.5 mL 乙酰丙酮溶于 50 mL 0.1 ml/L 碳酸钠溶液中)、0.1 mL NaOH 溶液( 5 mol/L) 和 0.5 mL 蒸馏水，放入沸水浴中 15 min；冷却 5 min，放入冰水浴 10 min;室温放置 10 min，加入 1 mL
P-DAB 显色剂( 0.8g DBMA 与 15mL 浓 HCl 以及无水乙醇混合均匀)；充分振荡后，加入无水乙醇3.5 mL，室温放置 30 min，显色，取150μL置96孔板放入酶标仪在 530 nm 处测定 1、2、3、4 号四支试管的吸光度 A1、A2、A3、A4。按下式计算透明质酸酶的抑制率：
透明质酸酶抑制率= ) [1− （A1- A2）/(A3- A4 )]×100%

问题是计算出来的抑制率超过100%和有些是负的，放入沸水浴后样品和空白都显示是棕红色，配的显色剂是浅绿色，不知道是什么原因，有咩有做过的大神指导指导啊？
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1楼 2021-12-17 11:07:57
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一支喵

新虫 (初入文坛)
★
susu1014(金币+1): 谢谢参与
您好，我现在正在做这个实验，样品组和空白组都是淡粉色，差别不大，请问你后面实验成功了吗？

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22楼2023-05-05 22:58:23
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chenhuanlong

禁虫 (文学泰斗)
★
susu1014(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
4楼2021-12-17 14:20:29
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xiaoshuang113楼
2021-12-22 00:04   回复  
susu1014(金币+1): 谢谢参与
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nono20099楼
2021-12-18 00:00   回复  
susu1014(金币+1): 谢谢参与
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james-james2楼
2021-12-17 11:08   回复  
susu1014(金币+1): 谢谢参与
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bjdxyxy8楼
2021-12-17 23:38   回复  
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蹦蹦布丁7楼
2021-12-17 20:44   回复  
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春意-盎然10楼
2021-12-19 21:45   回复  
susu1014(金币+1): 谢谢参与
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