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[交流]
透明质酸抑制率实验样品组和空白对照都显色?
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实验方法:采用 Elson-Morgan 改良法测定一系列浓度(1-4mg/mL)的样品与透明质酸酶的作用,1、2 号试管( 0.5 mL 样品溶液和 0.5 mL 浓度 600 U/mL 透明质酸酶) ,3、4 号试管( 0.5 mL 蒸馏水和 0.5 mL 醋酸缓冲液) ,37 ℃保温 20 min;加入 0.1 mL ( 2.5 mol/L) 氯化钙溶液, 37 ℃保温 20 min;1、3 号试管中加入 0.5 mL 0.5 mg/mL 的透明质酸钠,2、 4 号试管中加入 0.5 mL 醋酸缓冲液,37 ℃保 温 40 min;室温放置 10 min,加入 0.5 mL 乙酰丙酮溶液( 3.5 mL 乙酰丙酮溶于 50 mL 0.1 ml/L 碳酸钠溶液中)、0.1 mL NaOH 溶液( 5 mol/L) 和 0.5 mL 蒸馏水,放入沸水浴中 15 min;冷却 5 min,放入冰水浴 10 min;室温放置 10 min,加入 1 mL P-DAB 显色剂( 0.8g DBMA 与 15mL 浓 HCl 以及无水乙醇混合均匀);充分振荡后,加入无水乙醇3.5 mL,室温放置 30 min,显色,取150μL置96孔板放入酶标仪在 530 nm 处测定 1、2、3、4 号四支试管的吸光度 A1、A2、A3、A4。按下式计算透明质酸酶的抑制率: 透明质酸酶抑制率= ) [1− (A1- A2)/(A3- A4 )]×100% 问题是计算出来的抑制率超过100%和有些是负的,放入沸水浴后样品和空白都显示是棕红色,配的显色剂是浅绿色,不知道是什么原因,有咩有做过的大神指导指导啊? |
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21楼2022-10-11 15:10:59
chenhuanlong
禁虫 (文学泰斗)
★
susu1014(金币+1): 谢谢参与
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4楼2021-12-17 14:20:29
简单回复
xiaoshuang113楼
2021-12-22 00:04
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nono20099楼
2021-12-18 00:00
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susu1014(金币+1): 谢谢参与
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2021-12-17 11:08
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bjdxyxy8楼
2021-12-17 23:38
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蹦蹦布丁7楼
2021-12-17 20:44
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春意-盎然10楼
2021-12-19 21:45
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susu1014(金币+1): 谢谢参与
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