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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 毕赤酵母组氨酸缺陷型
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者研究啥123将赠送您 50 个金币

研究啥123

新虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母组氨酸缺陷型 已有1人参与

各位大神，求助一下，我质粒用的是pPICZαA，电转进毕赤酵母GS115后，在摇瓶中用BMGY和BMMY培养基可以正常生长表达，但是我在5L发酵罐用的BSM和FM22培养基（加了组氨酸）不能正常生长，菌体涨不起来，而且发酵大约20小时左右，溶氧长到130%-150%，不知道是什么原因？
求各位大神指点
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1楼 2021-12-15 14:59:31
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borrysa

金虫 (正式写手)
这个质粒不是万古霉素标签吗？能用营养缺陷型培养基？

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2楼2021-12-15 16:50:36
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kk26

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
甲醇利用效率低，作为唯一碳源，生长缓慢。发酵过程通常会使用甘油做碳源先积累菌体，后期用甲醇诱导蛋白表达。
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坚持的保持一种热爱！
3楼2021-12-16 10:55:57
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研究啥123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by borrysa at 2021-12-15 16:50:36
这个质粒不是万古霉素标签吗？能用营养缺陷型培养基？

是博来霉素的抗性，不知道为什么无机盐培养基养不起来
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4楼2021-12-21 20:50:08
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研究啥123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kk26 at 2021-12-16 10:55:57
甲醇利用效率低，作为唯一碳源，生长缓慢。发酵过程通常会使用甘油做碳源先积累菌体，后期用甲醇诱导蛋白表达。

是的，我前期是用甘油作为碳源积累菌体量，但是现在的问题是在菌体富集阶段菌体量达不到，文献中大多可以OD600为200左右，但是我的才50多，请问知道原因吗
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5楼2021-12-21 20:52:51
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雪色残洋

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 研究啥123 at 2021-12-21 20:50:08
是博来霉素的抗性，不知道为什么无机盐培养基养不起来...

拿到菌株后，有没有筛选高拷贝子的菌株
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6楼2022-01-10 13:41:14
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许阿君

新虫 (初入文坛)
朋友我想问下，在BMGY揺甁中你的浓度可以达到OD多少

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7楼2022-04-07 10:21:03
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